Tipificación por Secuenciación Multilocus de un panel de nuevos aislados de Trypanosoma cruzi provenientes de la provincia de Chaco y evaluación de la posible aplicación sobre muestras biológicas

JUAN JOSÉ LAUTHIER; MARÍA M. MONJE RUMI; PAULA G. RAGONE; ANAHÍ M. ALBERTI DAMATO; NICOLÁS TOMASINI; CECILIA PÉREZ BRANDAN; ALEJANDRO UNCOS; PATRICIO DIOSQUE

Santa Fe

Congreso; XXIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2009

Sociedad Argentina Protozoologia

La tipificación por secuenciación multilocus (MLST, Multilocus Sequence Typing), es una técnica que permite identificar una gran variabilidad genética dentro y entre los linajes filogenéticos de Trypanosoma cruzi (TC). En trabajos previos definimos un esquema de tipificación, al examinar sobre un panel de clones representativos de la diversidad de TC en nuestra área de estudio en áreas rurales de Chaco, un total de 10 fragmentos de genes metabólicos. Este esquema, se basa en el análisis de 3 fragmentos de genes (rho-like GTP binding protein, Small GTP-binding protein Rab7, y Glucosa-6-fosfato isomerasa). En el presente trabajo, se puso a prueba este esquemade tipificación sobre un panel de 45 nuevos aislados obtenidos simultáneamente en las localidades de Las Leonas (ciclo doméstico y peridoméstico) y El Palmar (ciclo silvestre), del departamento 12 de Octubre, en la Provincia de Chaco. El algoritmo MLST utilizado permitió identificar los genotipos circulantes, tanto en el ciclo doméstico/peridoméstico como en el ciclo silvestre, detectándose la presencia de los linajes TCI, TCIIc, TCIId y TCIIe. Estos resultados se corresponden con aquellos obtenidos mediante MLEE y RAPD para el mismo conjunto de aislados, aunque mediante MLST se demostró una mayor variabilidad para TCI. Por otra parte, con el fin de evaluar la utilidad de MLST como posible técnica diagnóstica, se realizaron ensayos sobre muestras biológicas provenientes de ratones infectados artificialmente con diferentes genotipos de TC circulantes en la misma zona de estudio. Los resultados preliminares obtenidos para un fragmento del gen GPI fueron satisfactorios, sugiriendo que esta técnica podría ser empleada directamente sobre muestras biológicas, aunque se necesitan más estudios para determinar la sensibilidad y especificidad de estos ensayos. Financiado por: Institute de Recherche pour le Développement (IRD), Francia; Seventh Framework Programme, European Commission; FONCyT; CIUNSa.