Biosíntesis diferencial de Allopregnanolona en la pubertad y efecto del neuroesteroide sobre la liberación de GABA hipotalámica.

GIULIANI FERNANDO; ESCUDERO CARLA; CASAS SEBASTIÁN; GARCÍA SEBASTIÁN; BAZZOCCHINI VANESA; YUNES ROBERTO; CABRERA RICARDO

Mar del Plata

Congreso; Sociedad Argentina de investigación clínica 2010; 2010

La pubertad en ratas comienza con un aumento en la liberación pulsátil de LHRH, y se hace evidente con la aperura vaginal (AV) hacia los 39d de edad. Este proceso es controlado por factores como GABA y otros neurotransmisores liberados en el hipotálamo medial basal (HMB) y área preóptica anterior (APO), y modulados a su vez por neuroesteroides, tales como allopregnanolona (Allo). Previamente demostramos que Allo incrementa la liberación de glutamato en HMB/APO durante el estadio puberal (P) (55d). Además determinamos que la expresión génica de 3α-HOR, enzima que sintetiza Allo, se encuentra aumentada en AV y en P versus ratas prepúberes (PreP) de 30d. En este trabajo nuestros objetivos fueron: 1) determinar si allopregnanolona modula la liberación de GABA en HMB/APO de ratas púberes (P) y 2) medir la actividad enzimática de 3α-HOR en PreP, AV y P. Métodología: 1) Se usaron HMB/POAs de ratas P a los que se realizó un ensayo de liberación de [3H]-GABA evocada por K+ 28mM, superfundiéndolos con ya sea buffer KRBG libre de Mg++ (control) o allopregnanolona 120nM. Los resultados se expresaron como porcentaje de liberación de [3H]-GABA y se analizaron por test Student. 2) HMB/APOs de ratas P, AV y PreP, se homogeneizaron y centrifugaron para separación de las fracciones citoplasmáticas a las que se realizó el ensayo enzimático de 3α-HOR por medición espectrofotométrica de la oxidación de NADPH. Los resultados se expresaron como mUI/mg prot y fueron analizados por ANOVA I y test de Tukey. Resultados: 1) Allo aumenta la liberación de [3H]-GABA con respecto al control (P