EFECTO DE HOMOCISTEINA-TIOLACTONA EN CULTIVOS DE CÉLULAS ENDOTELIALES

CHAMORRO MARÍA EUGENIA; MALTANERI ROMINA EUGENIA; SCHIAPPACASSE AGUSTINA; QUINTANA IRENE; GENOUD VALERIA; VITTORI DANIELA; NESSE, ALCIRA

Congreso; LX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2015

Lahiperhomocisteinemia (HHcy) ha sido asociada a la disfunción e injuriaendotelial involucrada en el desarrollo de trombosis y ateroesclerosis.Recientemente, se ha propuesto que la homocisteína-tiolactona (HTL), especiealtamente reactiva, sería responsable de la acción perjudicial de la HHcy. Lareacción de N-homocisteinilación ocurre cuando HTL acila los residuos lisina delas proteínas.   Lapresencia de suero en el cultivo de células endoteliales permite sucrecimiento, migración y desarrollo. El objetivo de este trabajo es estudiar elefecto de suero tratado con HTL en la migración de la línea endotelialEA.hy926. Suero fetal bovino fue incubado en presencia de HTL (concentracionesfinales 2 y 4 mM) durante 18 h, a 37 °C (SFB-HTL). Control: SFB incubado conPBS. Por electroforesis capilar y electroforesis en gel de poliacrilamida encondiciones nativas se observaron cambios en el patrón de bandas proteicas y,en particular, modificación de la movilidad electroforética de la albúmina. Ladisminución de la carga neta negativa de las proteínas corrobora el bloqueo deresiduos lisina por la reacción de N-homocisteinilación.Seestudió la acción del SFB N-homocisteinilado sobre la migración celularmediante la prueba de scratching con la cuantificación de la migraciónpor el ancho de la herida y sobre la proliferación celular por el ensayo deMTT. En presencia del SFB-HTL la migración celular disminuyó en comparación conlos cultivos con SFB, en forma dependiente de la concentración de HTL (Tamañode la herida: SFB 10±4,3%; *SFB-HTL2 37±7,1%; *SFB-HTL4 59±9,0%; *P<0,05 vs.SFB; n=5). La proliferación celular no fue alterada por la presencia delSFB-HTL.La N-homocisteinilación de las proteínas delsuero altera su efecto promigratorio sobre las células endoteliales frente auna injuria, sugiriendo un posible mecanismo de acción antiangiogénica.