EFECTO DIFERENCIAL DE ERITROPOYETINA Y SU DERIVADO CARBAMILADO SOBRE CÉLULAS ENDOTELIALES

MALTANERI ROMINA EUGENIA; CHAMORRO MARÍA EUGENIA; NESSE ALCIRA; VITTORI DANIELA

Congreso; LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013

Diversos estudios han demostrado efectos de la eritropoyetina (Epo) y su derivado carbamilado (cEpo) en células no hematopoyéticas. Se ha descrito que, en células endoteliales, Epo induce proliferación, mantiene la integridad vascular y promueve angiogénesis, si bien los mecanismos no han sido dilucidados por completo. El objetivo de este trabajo fue comparar los efectos de Epo y cEpo sobre la actividad de células endoteliales de vena umbilical humana (HUVEC) e identificar las vías de señalización involucradas.La cEpo fue caracterizada por electroforesis capilar de zona, electroforesis nativa en gel de poliacrilamida y Western blotting, así como por su acción antiapoptótica y no eritropoyética en líneas celulares de neuroblastoma (SH-SY5Y) y eritroleucemia (UT-7).  En células HUVEC, ambas eritropoyetinas estimularon la producción de nitritos (Griess) y mostraron efecto antioxidante (ROS, citometría de flujo). Un posible efecto protector frente a un daño tisular fue evaluado por la migración endotelial mediante el ensayo de scratching (medida de la magnitud de la herida a las 24 h como porcentaje del valor inicial). El tratamiento con Epo (200 ng/ml) provocó disminución significativa del tamaño de la herida, no observada con 200 ng/ml de cEpo (Control: 86±4,8%; *Epo: 66±4,9%; cEpo: 84±4,7%; *p<0,05; n=6). El efecto promigratorio de Epo fue bloqueado en ensayos de inhibición con anticuerpo anti EpoR pero no por bloqueo de la subunidad β-common. Los resultados sugieren un efecto promigratorio de Epo sobre el endotelio a través de la vía de señalización del receptor homodimérico EpoR/EpoR, como lo indicarían los ensayos de bloqueo, mediante mecanismos similares a los observados en células eritroides. La migración no sería estimulada a través del heteroreceptor EpoR/β-common. Se demostró un efecto diferencial de Epo y cEpo sobre la migración celular frente a un daño del endotelio, al igual que el observado previamente sobre la proliferación de células hematopoyéticas.