Estudio de receptores involucrados en los efectos de la eritropoyetina y su derivado modificado por carbamilación.

CHAMORRO MARÍA EUGENIA; WENKER SHIRLEY; VITTORI DANIELA; NESSE, ALCIRA

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

Además del efecto eritropoyético, la eritropoyetina (Epo) es reconocida por su acción antiapoptótica en tejidos no hematopoyéticos pero para este uso terapéutico debe evitarse el aumento de la masa eritroide. La Epo carbamilada (cEpo) parece cumplir este requisito. En trabajos nuestros y de otros autores se demostró la actividad neuroprotectora no-eritropoyética de cEpo. En este trabajo comparamos mecanismos de acción entre Epo y cEpo. En ensayos con inhibidores observamos que el efecto neuroprotector de Epo o cEpo en células SH-SY5Y inducidas a apoptosis es mediado por activación de PI3K y Jak2 (MTT, Hoechst). Se ha postulado la acción de Epo y cEpo a través de distintos receptores, aunque existe controversia. Por ello estudiamos la modulación de la expresión (Western blotting) del REpo clásico y del heteroreceptor REpo-beta common (subunidad del receptor de IL-3), en las líneas UT-7 (Epo-dependiente) y SH-SY5Y. La expresión del REpo aumentó en células UT-7 al ser deprivadas de Epo o en presencia de cEpo (diferencia con Epo), mientras que en las SH-SY5Y no se observaron diferencias entre Epo y cEpo. La expresión del receptor βc aumentó por acción de cEpo en ambas líneas celulares. Investigamos posibles efectos competitivos entre Epo y cEpo sobre el desarrollo de unidades formadoras de colonias eritroides (CFU-E) de ratón. La adición simultánea de una elevada concentración de cEpo (200 ng/ml) inhibió la acción de Epo (20 ng/ml), efecto no observado en cultivos estimulados con Epo 1 h antes de la adición de cEpo (CFU-E/104 S/Epo 197±10; Epo 460±9; cEpo 194±11*; Epo-cEpo10x 206±15*; Epo1h-cEpo10x 437±10**; *P<0,001 vs. Epo; **NS vs. Epo, n=6). Los resultados muestran similitud de mecanismos de acción de Epo y cEpo sobre células neuronales. El aumento de la expresión del receptor beta c en ambos tipos celulares no asegura su participación en la acción diferencial de cEpo. Los ensayos de competencia abren un nuevo interrogante en las vías de activación por Epo.