INVESTIGADORES
CHAMORRO Maria Eugenia
congresos y reuniones científicas
Título:
EXPRESION Y ACTIVIDAD DE LA PROTEÍNA TIROSIN-FOSFATASA 1B EN CÉLULAS UT-7 ACTIVADAS POR ERITROPOYETINA
Autor/es:
CALLERO MARIANA; PÉREZ GLADYS; VITTORI DANIELA; CHAMORRO MARÍA EUGENIA; NESSE ALCIRA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La
importancia de la fosforilación de residuos de tirosina del receptor
de eritropoyetina (EpoR) durante la activación celular por Epo ha
enfocado la atención en las proteínas tirosin-fosfatasas (PTP) como
probables mediadores implicados en procesos fisiopatológicos como
policitemia y resistencia a terapia con rhuEpo. El prototipo de la
familia PTP es la PTP1B. Esta fosfatasa, localizada tanto en el citosol
como en la membrana del retículo endoplasmático, se relaciona con la
regulación de vías de señalización que involucran la fosforilación de
tirosina inducida por factores de crecimiento, citoquinas y hormonas,
por lo que se ha sugerido que actúa como modulador negativo del EpoR y
del receptor de insulina. El objetivo de este trabajo fue investigar la
acción de la Epo sobre la expresión de PTP1B, utilizando como modelo
experimental la línea UT-7 dependiente de Epo. Las
células, deprivadas de suero y Epo durante 18 h, fueron estimuladas
con Epo por diferentes períodos. La expresión de PTP1B a nivel de ARNm y
proteína fue analizada por Real Time PCR y
Western Blot, respectivamente. La actividad enzimática fue evaluada en
el inmunoprecipitado, obtenido con anti-PTP1B, a través de la
hidrólisis de pNPP y el producto se cuantificó espectrofotométricamente
a 415 nm. Se incluyeron ensayos con pretratamientos de las células con
Ly294002 (inhibidor de PI3K) o AG490 (inhibidor de JAK2). El nivel de
ARNm de PTP1B aumentó por la estimulación con Epo, correlacionándose
con la inducción de la expresión observada por Western blot. Además, la
estimulación con Epo indujo fosforilación de tirosinas y aumento de la
actividad enzimática de PTP1B. El pretratamiento de las células con
Ly294002 o AG490 inhibió la expresión de PTP1B por Epo asociada a un
aumento en la fosforilación de los residuos de tirosina y de la
actividad enzimática de la PTP1B, sugiriendo la existencia de una
regulación recíproca entre la PTP1B y la Epo.
