Acción de la eritropoyetina frente a la muerte celular inducida por hipoxia en células de origen neuronal

WENKER SHIRLEY; CHAMORRO MARÍA EUGENIA; VOTA DAIANA; VITTORI DANIELA; NESSE, ALCIRA

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2008

La deficiencia de oxigeno es un  factor de estrés que induce múltiples respuestas. A nivel celular, la  exposición a hipoxia puede inducir una desregulación metabólica con pérdida de  la homeostasis y muerte celular. La eritropoyetina (Epo) es una citoquina  pleiotrópica originalmente definida por su rol en la eritropoyesis. El hallazgo  de receptores específicos en tejidos no hematopoyéticos, expandió su acción  biológica y farmacológica. Si bien la Epo constituye un factor de protección  celular frente a estímulos apoptóticos, poco se sabe acerca de la modulación de  su acción. El objetivo de este trabajo es estudiar la acción antiapoptótica de  Epo sobre células neuronales SH-SY5Y, bajo distintas condiciones de  diferenciación, expuestas a condiciones de hipoxia (O2: 5-7%). En células  indiferenciadas, la hipoxia (H) indujo a) cambios morfológicos (microscopía  electrónica) con pérdida de adhesión celular y disminución de neuritogénesis,  b) significativa disminución de la viabilidad celular (MTT) en forma  tiempo-dependiente (H-16h 71±9%, H-24h 28±15%; p<0,05 vs. C) y c) aumento  significativo de apoptosis determinado por tinción con Hoechst (H16 27±2% vs. C  P<0,05) y clivaje de PARP. La diferenciación celular por ácido retinoico  (AR) aumentó la resistencia a la apoptosis inducida por hipoxia (AR-H16h 7±2%  vs. H16h p< 0,05), atribuido, probablemente, a la regulación positiva de  Bcl-2. El pretratamiento con Epo (9 h, 25 U/ml) previno los efectos de la  exposición a hipoxia (MTT: H 71±7%, E/H 100±29%; P<0,05; Apoptosis: H 28±1%,  E/H 7±2%; P<0,001). Este efecto resultaría de una acción antagónica a la  inducida por hipoxia a nivel de la regulación de Bcl-xL. El postratamiento con  Epo luego de 2 h de hipoxia simultáneamente con la reoxigenación revirtió  parcialmente el daño celular inducido por hipoxia/reoxigenación. La acción  diferencial de la Epo frente a la muerte celular inducida por hipoxia o  hipoxia/reoxigenación sugiere distintos mecanismos involucrados en ambos  procesos.