Separación de células plasmáticas por citometría de flujo para la detección de alteraciones citogenéticas en mieloma múltiple

GALLEGOS MORENO; YANTORNO, S; SZELAGOWSKI, M; ENRICO, A; ROSERO, J; SANCHEZ, J; SALAZAR HIDALGO, A; GREGORIO, C; COLLAZOS, J; ÁLVAREZ, M; RUMBO, MARTIN; DOCENA, GUILLERMO; BONDAR, CONSTANZA; MILONE, JORGE

Mar del Plata

Congreso; XXVI Congreso Argentino de Hematologia; 2023

IntroducciónEl Mieloma Múltiple es una neoplasia hematológica maligna caracterizada por un curso clínico heterogéneo, basado en la diversidad de alteraciones genéticas implicadas en la evolución de la enfermedad. La determinación de estas anomalías genéticas permite predecir el comportamiento de la patología así como guiar las decisiones terapéuticas sobre los pacientes. La hibridación flourescente in situ (FISH) permite el estudio de alteraciones genéticas pronósticas; dependiendo la sensibilidad de detección del porcentaje de células plasmáticas analizadas en la muestra. El empleo de la separación celular por citometría de flujo o cell sorting permite seleccionar estas células del resto y separarlas para estudio, aumentando de esta manera la sensibilidad de los determinaciones a realizar.ObjetivosEvaluar los resultados y beneficios de la separación celular por citometría de flujo (Sorting) como técnica de selección de células plasmáticas para la detección de alteraciones citogenéticas en mieloma múltiple por FISH.Materiales y métodosSe realizó un análisis retrospectivo a partir de revisión de resultados de 55 pacientes con diagnóstico de Mieloma Multiple entre junio de 2021 y abril de 2023. La identificación y cuantificación de células plasmáticas aberrantes se realizó por citometría de flujo multiparamétrica con panel de 8 colores según panel EuroFlow. Las alteraciones citogenéticas con impacto sobre el pronóstico fueron evaluadas por FISH. Se utilizaron sondas para evaluar t (4;14), t (14;16), t (14;20), del 17 p y alteraciones del cromosoma 1. Los pacientes fueron divididos en dos grupos según de acuerdo a si los estudios por FISH fueron realizados en células plasmáticas purificadas (grupo S), o sobre muestras enteras (grupo NS). La separación celular fue realizada a través del programa PITES-27: Proyecto de investigación y desarrollo interinstitucional para generar capacidades de alto impacto en investigación en ciencias de la vida y lograr mejoras en diagnóstico y tratamiento de enfermedades oncohematológicas. CONICET. El análisis estadístico se realizó utilizando las herramientas del programa SPSS.ResultadosSe incluyeron 55 ptes, 20 sometidos a sorting y 35 sin sorting, 32 mujeres y 23 hombres. La mediana de edad fue de 65 años (rango: 45-79). En el grupo S, la media células plasmáticas pre sorting fue de 8.49% (0.11-40.2%) y post sorting la media fue de 93% (17.8-98.6%). El promedio de enriquecimiento de células plasmáticas fue de 82.3 veces el valor inicial. En el grupo S , 8/12 (40%) determinaciones fueron positivas para las alteraciones citogenéticas (AC) estudiadas, mientras que 2/35 (5.7%) resultaron positivas en el grupo NS. Las AC encontradas en el grupo S fueron: t(4;14): 15% (3/20), gan 1q: 15% (3/20), del 17p: 20% (4/20),. En tanto que el grupo NS las AC fueron: del 17p: 5.7% (2/35), del 1p: 2.8% (1/35).ConclusionesLa separación de células plasmáticas por citometría de flujo (sorting) aumentó de manera significativa el número de células clonales evaluadas posteriormente por FISH (82 veces) en nuestra serie de casos. Esto permitió determinar alteraciones genéticas de mal pronóstico, cambiando el riesgo pronóstico y la estrategia terapéutica en un grupo significativo de pacientes respecto a aquellos en los que las determinaciones se realizaron en células plasmáticas no seleccionadas