Estudio de la interacción in vivo de la proteína supresora de silenciamiento P0 del Cotton leafroll dwarf virus con proteínas del hospedante

DELFOSSE VC; AGROFOGLIO, YC; CASSE, MF; HOPP, HE; BONACIC KRESIC, I; ZIEGLER-GRAFF, V; DISTÉFANO, AJ

Congreso; XI Congreso Argentino de Virología II Congreso Latinoamericano de Virología; 2015

Sociedad Argentina de Virología y la American Society for Microbiology

El algodón es un cultivo regional clave en el NEA. La ?enfermedad azul? del algodón fue reportadaen la Argentina durante la campaña agrícola 1982/83 y actualmente causa importantes pérdidasen el cultivo si no se implementan medidas adecuadas de control. La enfermedad es producida porel Cotton leafroll dwarf virus (CLRDV) y el virus es transmitido por el pulgón del algodón Aphidgossypii Glover. El CLRDV pertenece al género Polerovirus de la familia Luteoviridae, posee ungenoma de RNA simple cadena positiva (5,866 kb) que codifica para un total de seis proteínas.Nuestro grupo ha demostrado recientemente que la proteína P0CLRDV posee actividad supresoradel mecanismo de silenciamiento génico. Según lo reportado para la proteína P0 del polerovirusTurnip yellow virus, P0 interacciona con el sistema SCF-ubiquitin ligase y media la degradación dela proteína AGO1 de la vía de silenciamiento de la planta. Además, estos estudios indican quedicha interacción ocurre a través del dominio F-Box (LPXXL/IX10-13P) de la proteína P0.Con el objetivo de determinar si la proteína P0CLRDV interacciona con el sistema SCF-ubiquitin ligasese evaluó, mediante la técnica de doble hibrido en levaduras, la interacción de P0CLRDV con lasproteínas ASK de Arabidopsis thaliana y sus correspondientes ortólogos en Nicotiana benthamiana(SKP) y en su hospedador natural Gossipium hirsutum (GSK). Además, se evaluaron dichasinteracciones en mutantes de P0CLRDV en el dominio F-Box (P0CLRDV-Box), con el objetivo dedeterminar la implicancia de dicho dominio en el mecanismo de acción de P0CLRDV.Los resultados indicaron que P0CLRDV es capaz de interaccionar con SKP de N. benthamiana y GSKde G. hirsutum pero no fue posible determinar su interacción con ASK de A. thaliana mediante latécnica utilizada. Por otra parte P0CLRDV-Box perdió la capacidad de interaccionar con SKP. Estosresultados muestran que el mecanismo de acción de P0CLRDV se encuentra conservado respecto deotros P0 previamente caracterizados y que el dominio F-Box es indispensable para que ocurradicha interacción. Nuestros resultados representan un avance en la comprensión de la función deP0CLRDV como factor de patogenicidad del CLRDV.