Validación de un clon infectivo del cotton leafroll dwarf virus (CLRDV) como método alternativo para la transmisión de la enfermedad azul del algodón

CASSE, M.F.; DELFOSSE, V.C.; AGROFOGLIO, YC; HOPP, H.E.; BONACIC KRESIC, I; DISTÉFANO, A.J.

Brasilis

Congreso; 9° Congresso Brasileiro do Algodón; 2013

Associacao Brasileira dos productores de algodao

Validación de un clon infectivo del Cotton leafroll dwarf virus (CLRDV) como método alternativo para la transmisión de la enfermedad azul del algodón. María Florencia Casse1, Verónica C. Delfosse2, Yamila C. Agrofoglio2, Esteban Hopp2, Iván Bonacic Kresic1, Ana J. Distéfano2 1 EEA Roque Sáenz Peña, INTA-Chaco. 2 Instituto de Biotecnología, CICVyA-INTA-Castelar. La enfermedad de origen viral más importante en el cultivo de algodón en Sudamérica es la enfermedad azul, y es producida por el Cotton leafroll dwarf virus (CLRDV). El CLRDV es transmitido en forma persistente, circulativa y no-propagativa por el pulgón del algodón Aphis gossypii Glover, no siendo posible su transmisión mecánica. En los programas de mejoramiento, la evaluación de resistencia a CLRDV en germoplasma de algodón se realiza mediante la inoculación con áfidos infectivos mantenidos en invernáculo bajo condiciones controladas durante todo el año. Esta metodología es compleja y limita la cantidad de germoplasma a evaluar. Nuestro grupo ha desarrollado un sistema alternativo de infección mediante la construcción de un clon infectivo de cDNA del CLRDV y un método eficiente de inoculación via agroinfección. El clon infectivo del CLRDV logró establecer la infección en plantas de algodón susceptibles, que desarrollaron los síntomas típicos de enfermedad azul, detectándose la presencia del virus en las hojas sistémicas. El objetivo del presente trabajo es comparar el sistema de agroinfección con el clon infectivo del CLRDV y el sistema clásico de infección con áfidos, en variedades de algodón susceptibles y resistentes a enfermedad azul y analizar si hay diferencias en la respuesta de las variedades estudiadas frente a la infección con ambos sistemas. Se utilizaron dos variedades resistente al CLRDV, Guazuncho 2 INTA y NuOpal, y dos variedades susceptibles, NC33B y Stoneville 474, que fueron inoculadas con el clon infectivo y con áfidos infectivos. A las 3-4 semanas post-infección se comenzó a registrar la presencia / ausencia de síntomas típicos del CLRDV. La infección se analizó en las hojas sistémicas mediante RTPCR entre los 30 y 60 días postinoculación. Las plantas de las variedades resistentes, Guazuncho 2 INTA y NuOpal, no presentaron síntomas de la enfermedad y no se detectó RNA viral con ninguna de las dos técnicas de infección analizadas. El porcentaje de infección para las variedades susceptibles agroinfiltradas con el clon infectivo fue del 60% para NC33B, en dos ensayos independientes, y del 46% para Stoneville 474. Con la técnica del insecto vector el porcentaje de infección fue del 41% y 54% para NC33B, en dos ensayos independientes, y del 19% para Stoneville 474. Los resultados mostraron que no hay diferencias en la respuesta de las variedades estudiadas frente a la infección con CLRDV utilizando ambos sistemas. En las variedades susceptibles se observó un mayor porcentaje de infección cuando se utilizó el clon infectivo debido a una mayor eficiencia del método. A partir de los resultados concluimos que el clon infectivo del CLRDV podría utilizarse como sistema de infección de rutina en los programas de mejoramiento de algodón, siendo un método más sencillo y procesivo que el sistema de áfidos infectivos.