La preexposición a contaminantes ambientales altera la respuesta inmune a la infección pulmonar por Mycobacterium phlei en un modelo murino in-vivo

V. DELFOSSE; M. PALMIERI; S. FERRARO; M. ZUMÁRRAGA; D. TASAT; A. GIOFFRÉ

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología; 2010

Asociación Argentina de Microbiología

Es conocido que las micobacterias ambientales (MA) son patógenos oportunistas sin embargo, en pacientes inmunocomprometidos la incidencia de las infecciones aumenta. Por otra parte, el aumento de los contaminantes ambientales aéreos, material particulado (MP) en suspensión y gases, inducen un drástico incremento en el porcentaje de las enfermedades ambientales. Dado que la exposición al humo del cigarrillo y la contaminación asociada al uso del carbón como combustible han sido identificadas como factores de riesgo para la infección y el desarrollo de enfermedades, la contaminación aérea no debería ser subestimada en la incidencia y/o evolución de las mismas. Hasta el momento no se han descripto estudios que evalúen el efecto del MP sobre la respuesta del sistema inmune innato a micobacterias. Por ello, seleccionamos a Mycobacterium phlei, una especie usualmente no patógena en el hombre y, a ROFA (Residual Oil Fly Ash) como MP para estudiar en ratones BALB/c la susceptibilidad a la infección en pulmón.Los animales se dividieron en 4 grupos (n=16): Controles (Co), expuestos intranasalmente a 30µg ROFA (R), infectados con 8.106UFC M. phlei (I) y, expuestos e infectados (RI). Previamente la identidad de la micobacteria se confirmó a través de la secuencia parcial del gen hsp65. La respuesta al tratamiento se evaluó en pulmón a través del recuento de unidades formadoras de colonias y, en el BAL mediante los siguientes parámetros biológicos: 1) recuento de células totales (RCT), 2) análisis de la composición celular (CD) mediante tinción con hematoxilina y eosina, 3) cuantificación de la producción del anión superóxido mediante el test del NitroBlue Tetrazolium (NBT), 4) cuantificación de la producción de IFN-gamma e IL-10 mediante la técnica de ELISA.Si bien el RCT no mostró diferencias significativas entre los grupos (Co: 1,2±0,4.106; R: 1,2±0,3.106; I: 2,1±0,6.106; RI: 1,6±0,7.106) el CD, reveló para todos los tratamientos una reducción en el porcentaje de macrófagos alveolares respecto del control (R: 17%; I: 53%; RI: 36%). La producción de anión superoxido aumentó significativamente para todos los tratamientos respecto del grupo Co (Co: 21,5±1,4; R: 34,2±0,3; I: 52,9±3,1; RI: 47,8±1,9). Aunque la producción de IFN-gamma se mantuvo constante (13±0,5pg/ml), la de IL-10 disminuyó en el grupo R (16,7±2,4pg/ml) y aumentó en los dos grupos infectados (I: 54,8±2,1pg/m; RI: 47±9,6pg/ml) respecto del Co (35,7±4,7pg/ml). Llamativamente, la carga bacteriana en pulmón fue mayor en los animales del grupo RI (1,6±1,08.109 UFC) respecto del grupo I (5,04±0,05.108 UFC). Estos resultados muestran que la pre-exposición a ROFA altera la composición del BAL, aumenta la generación de anión superóxido e inhibe la actividad antimicobacteriana. Si bien esta última observación no se ve reflejada en los valores de las citoquinas analizadas, los resultados señalan a la contaminación ambiental como un factor potencialmente decisivo en la progresión de la infección.