Rol crítico de la prostaglandinaE2 (PGE2) y de su receptor tipo 2 (EP2) en la expansión de las células del cumulus (ECC) en monas Rhesus

PELUFFO, MC; MURPHY, MJ; ZELINSKI, MB; LINDENTHAL, B; STOUFFER, RL; HENNEBOLD, JD

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LVII Reunión Anual de la SAIC; 2012

SAIC (Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas)

Antes de la ovulación el pico de LH desencadena la ECC, la cual implica la pérdida de contacto entre las células del cumulus (CC) y la formación de una matriz extracelular rica en ácido hialurónico (AH), causando una expansión en el área del complejo ovocito células del cumulus (COC). Este proceso es indispensable para que el ovocito ovulado, pueda ser eventualmente penetrado por el espermatozoide. El objetivo fue determinar el rol de la PGE2 en la ECC en monas Rhesus in vitro y comparar sus efectos respecto al de las gonadotrofinas (G). Se obtuvieron COCs (n=3-6/tratamiento; c/experimento/3-4) a partir de monas adultas sometidas a tratamientos de estimulación y cultivados en medio TALP conteniendo: a) 5% suero de mono (MS); b) MS+FSH+LH (100 ng/ml, c/u); c) MS+PGE2 (500 ng/ml). Se analizó la variación en el área de los COCs a distintos tiempos, observándose que el control (-) (MS) no ocasionó ECC. Las G promovieron la ECC de manera ambigua mientras que, la PGE2 indujo la ECC de modo sólido. Luego se evaluó la ECC de forma más específica desarrollando un método inmunofluorescente para detectar AH en el COC y se agregaron 2 grupos adicionales: d) FSH y e) LH. En el grupo con MS, la marca de AH fue mínima o inexistente. Ninguno de los grupos con G arrojó resultados uniformes y la marca de AH se observó sólo en la periferia de los COCs. En cambio, PGE2 incrementó los niveles de AH en todo el COC en todos los ensayos. Asimismo, un grupo f) conteniendo un antagonista específico del EP2 (ZK888-15 µM) en presencia de PGE2 fue incluido para analizar si la señalización de PGE2 era a través de EP2 y el AMPc fue evaluado para validar su inhibición. Se observó que el ZK888 bloqueó tanto la síntesis del AH como los niveles de AMPc (p< 0.05) inducidos por PGE2. Estos resultados demuestran por primera vez en primates que mientras las G impactan mínimamente en la ECC, la PGE2 induce la ECC y la estimulación de AH a través del EP2, sugiriendo un rol crítico de la PGE2 en la ECC.