Lactiplantibacillus plantarum MPL16: POTENCIAL PROBIÓTICO ACTIVO FRENTE A LA INFECCIÓN POR Enterococcus faecalis EN Caenorhabditis elegans

VERA, M.D.; D'ALMEIDA, R.E.; MÜLLER, M. F.; KITAZAWA, H.; VILLENA, J.; VIZOSO PINTO, MARIA GUADALUPE

Jornada; XIX Jornadas Argentinas de Microbiología; 2022

Asoc. Argentina de Microbiología

Enterococcus faecalis es un patógeno asociado a ambientes nosocomiales particularmente importante para la Organización Mundial de la Salud debido a su multiresistencia. Los probióticos son microorganismos vivos que administrados en cantidades suficientes promueven la salud de los consumidores. Algunos de los beneficios propuestos es el control de infecciones por otros patógenos ya sea por competencia, produciendo sustancias antimicrobianas o estimulando las defensas del huésped. El objetivo de este trabajo fue caracterizar a la cepa Lactiplantibacillus plantarum MPL16, aislada de wakame, un alimento fermentado japonés tradicional, en ensayos in vivo e in vitro frente a un aislado clínico de E. faecalis. Con este fin, desarrollamos un modelo de infección de E. faecalis en Caenorhabditis elegans en estadío L4 y evaluamos el efecto del pretratamiento con la cepa MPL16 sobre la sobrevida, fertilidad y carga microbiana del patógeno, determinando las UFC/ml en 10 ejemplares por muestra lisándolos con Tritón 2% con ayuda de un pistón. La actividad antimicrobiana directa se evaluó con el método de difusión en agar con el sobrenadante crudo de la cepa MPL16 crecida en MRS durante 18 hs, neutralizado e inactivado por calor en pocillos sobre un césped de E. faecalis en BHI. Cuando los nemátodos se infectan con E. faecalis, se observa distención intestinal, disminución de la fertilidad (reducción del número de huevos capaces de eclosionar y las larvas no alcanzan el estadío L3), y una letalidad del 50% (L50) en el día 5. Cuando los nemátodos recibieron el pretratamiento de alimentación con la cepa MPL16 24 hs antes de ser infectados, aumentó la sobrevida de los mismos llegando a L50 48 hs más tarde (día 7). Esto se correlacionó con una reducción de 1 log en las UFC/ml de los nemátodos infectados (2,2x106 UFC/ml) y tratados (2x105 UFC/ml) a partir del día 4 que se mantuvo sostenida en el tiempo. Por otro lado, la capacidad reproductora de los nemátodos tratados con MPL16 (los huevos eclosionaron y las larvas se desarrollaron normalmente). Con el ensayo de difusión en agar, observamos que la cepa MPL16 no tiene actividad antimicrobiana directa sobre E. faecalis. En conclusión, la cepa L. plantarum MPL16 tiene potencial probiótico para prevenir o mejorar las infecciones por E. faecalis. Postulamos que el efecto in vivo se debería a la modulación de la inmunidad innata y/o a la competencia por nutrientes y sitios de adhesión, pero no a la acción antimicrobiana directa de MPL16. Para corroborar esta hipótesis se necesitan más estudios. El modelo de infección de C. elegans por E. faecalis es sencillo, económico y constituye una excelente herramienta para la selección de cepas activas frente a estos patógenos y una alternativa rentable y ética a los modelos de mamíferos.