Adaptación de la técnica Simple Sequence Length Polymorphism (SSLP) con reactivos locales para el control genético de ratones y ratas endocriadas

FATIMA TORALES; MIÑO, SAMUEL; ROCIO TAU; CAROLA FERRECCIO; NATALIA BACHIR; ROMERA S.A.; MAIDANA S. S

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Año: 2021 p. 43 - 51

2718-7683

Uno de los problemas a los que se enfrenta la comunidad científica, los bioterios de producción y las empresas biotecnológicas es la autenticación genética de cepas consanguíneas de ratones y ratas utilizadas en la investigación, en producción y control de productos biológicos. Por lo tanto, nos propusimos adaptar, con insumos e infraestructura local, la técnica de SSLP utilizada internacionalmente para el monitoreo genético de animales de experimentación, e implementarla como servicio en Argentina. Seleccionaron 50 microsatelites (MITs) para diferenciar dos cepas de ratones y 26 para discriminar también dos de las cepas de ratas. Las reacciones de PCR para fueron realizadas según el protocolo sugerido por el fabricante de los reactivos, así como también las condiciones de ciclado. La electroforesis en gel de agarosa fue adaptada a las condiciones de nuestro laboratorio y los productos disponibles en nuestro país. Para la estandarización de la técnica se utilizó el ADN de cepas de ratones BALB/c y C57BL/6; y de ratas BN y SD/RiJ cedidas gentilmente por el Dr. Benavides. La validación de la técnica se llevó a cabo por dos operarios distintos, utilizando 2 termocicladores diferentes para evaluar la robustez de la misma. Se lograron amplificar exitosamente los 50 SSLP de ratones y 26 de ratas seleccionados, obteniéndose el patrón de bandas esperado para los controles utilizados. La técnica realizada con ADN de los controles positivos utilizados mostró ser robusta y 100% repetible, obteniéndose resultados idénticos por operarios diferentes y en termocicladores diferentes.