Micropropagación de estragón francés (Artemisia dracunculus L.)

DELUCHI, BERNARDO; MARINANGELI, PABLO; CURVETTO, NÉSTOR

CABA

Simposio; V SIMPOSIO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA VEGETAL; 2002

RedBIO ARGENTINA ASOCIACIÓN CIVIL

El objetivo de este trabajo fue ajustar un medio de cultivo para la producción de microplantas saneadas de estragón por el sistema de cultivo de segmentos uninodales.MetodologíaLas plantas de estragón francés (Artemisia dracunculus L.) fueron seleccionadas de plantaciones locales y cultivadas en invernáculo. Los meristemas con los dos primeros primordios foliares fueron extraídos desde brotes en activo crecimiento y cultivados en medio MS con las sales completas (MS1) o a la mitad de concentración (MS1/2) con 0,5 mg.L-1 de ANA y 0,5 mg.L-1 de BAP. Para la fase de multiplicación los microvástagos fueron subcultivados por segmentos uninodales en medio MS con la mitad de concentración de sales: 1- sin reguladores de crecimiento (MSSR), 2- con 0,5 mg.L-1 de ANA y 0,5 mg.L-1 de BAP (MSR), o 3- con 0,5 mg.L-1 de ANA, 0,5 mg.L-1 de BAP y 600 mg.L-1 de carbón activado (MSCA). Los microvástagos se rustificaron en contenedores multicelda con sustrato estéril en base a turba bajo tunel plástico a 25-30º C y más del 95% de HR; dos semanas después se trasplantaron a macetas con sustrato en base a turba, arena y perlita (proprción 3-3-2) en invernáculo.Se partió desde 20 ápices. Para la fase de multiplicación se repicaron entre 15 y 20 explantos por tratamiento durante tres subcultivos cada 15 días, de los que se cuantificó el número de vástagos y nudos producidos, la longitud del brote más largo y la presencia y número de raíces primarias. Se rustificaron más de 450 microplantas del tratamiento MSCA.Resultados y discusiónLos ápices cultivados en medio MS1 se oxidaron y murieron, mientras que de 11 explantos iniciados en medio MS1/2 dos produjeron vástagos débiles con necrosis apical y de algunas hojas, posiblemente debido a toxicidad por auxinas. Por esto y dado que la presencia de auxina puede afectar la brotación de yemas axilares desde segmentos uninodales, decidimos evaluar la suplementación del medio con carbón activado durante la fase de multiplicación (Dodds y Roberts, 1988). En promedio, los explantos en el medio MSCA produjeron una cantidad de microvástagos (2,6) y de nudos (15,2), y una longitud del microvástago principal (35 mm) significativamente mayor que los de los medios MSSR y MSR (1,7 y 1,3 microvástagos por explanto, 9,1 y 7,4 nudos por explanto y 12 y 10 mm de longitud del vástago principal, respectivamente). Los microvástagos del tratamiento MSR presentaron necrosis apical. El 92% de los microvástagos enraizaron al final de cada subcultivo en el medio MSCA, mientras que el enraizamiento fue significativamente menor en los medios MSSR (37%) y MSR (36%). MSR indujo callo en todos los microvástagos y un mayor número de raíces por microvástago enraizado (4,6) en comparación con los de MSCA (3,6) debido al efecto auxínico. El medio MSSR produjo significativamente menos raíces en los microvástagos (1,2). Se obtuvo más del 98% de plantas normales rustificadas.ConclusionesObtuvimos un protocolo muy eficiente de micropropagación de estragón con las siguientes ventajas: permite el saneamiento, garantiza un alto grado de identidad genética pues se basa exclusivamente en la activación de yemas axilares, alta tasa de multiplicación (15 segmentos nodales por segmento uninodal cada 15 días), no es necesaria la fase de enraizamiento pues casi todos los microvástagos producidos presentan raíces, lo que nos asegura una rustificación exitosa.