Mecanismos de acoplamiento entre transcripción y splicing alternativo en C. elegans

GODOY HERTS MICAELA; MONTI GONZALO; MARTIN MARIA EUGENIA; BUGGIANO VALERIA; ALBERTO KORNBLIHTT

colonia sacramento

Congreso; 1er Congreso de los Clubes del ARN de Argentina y Uruguay; 2022

club del ARN Uruguay

Dentro del universo de procesos que regulan la expresión genética elegimos estudiar el splicing: una serie de pasos en los que las secuencias de los intrones son eliminadas y las secuencias de los exones unidasentre sí, dando origen a un mensajero maduro (mRNA). Desde hace unos años, nuestro grupo estudia la regulación del splicing alternativo en plantas. En un trabajo reciente demostramos que la regulación delsplicing alternativo por acción de la luz en plantas responde al modelo cinético de acoplamiento descripto originalmente en células animales. Esta regulación ocurre a nivel de un organismo entero.El objetivo general del proyecto es estudiar la regulación del splicing alternativo en organismos enteros, usando C. elegans como modelo animal. Buscamos investigar mecanismos de acoplamiento entre latranscripción y el splicing alternativo en un organismo entero, en respuesta a estímulos externos del ambiente. Como estímulo elegimos un protocolo de hambreado en larvas de C. elegans: se observa que semodifican los patrones de una serie de eventos de splicing alternativo en respuesta a la presencia de alimento. Elegimos dos eventos representativos para continuar nuestro estudio. Encontramos que la inclusióndel exón alternativo de uno de ellos, el transcripto hrpf-1, aumenta en presencia de camptotecina, droga que inhibe la elongación de la transcripción. A su vez, la incubación con tricostatina A – droga que aumentala acetilación en histonas- produce el efecto opuesto. Estos resultados nos llevan a postular que la elongación de la transcripción puede estar involucrada en esta regulación. Realizaremos experimentos futuros desilenciamiento de factores de elongación y estudios del estado de fosforilación de la RNA polimerasa II para entender cómo opera un complicado mecanismo molecular en la respuesta de un organismo vivo antecondiciones naturaL