Efecto del Mycobacterium tuberculosis (MTB) sobre el proceso de diferenciación in vitro de monocitos (MO) de sangre periférica a células dendríticas (DC).

BALBOA LUCIANA; ROMERO MERCEDES,; YOKOBORI NOEMÍ; SCHIERLOS PABLO; GEFFNER LAURA; MUSELLA ROSA; ABBATE EDUARDO; ROLDÁN NICOLÁS; DE LA BARRERA SILVIA; SASIAIN MARÍA; ALEMÁN MERCEDES

Mar del Plata

Congreso; Congreso SAI-SAIC; 2007

SAI_SAIC

Las DC son células presentadoras de antígenos (CPA) claves en la inmunidad contra micobacterias por lo que, alteraciones en el proceso de diferenciación de Mo a DC tendrían un impacto directo en la generación de la respuesta adaptativa. Recientemente demostramos que los pacientes con tuberculosis pulmonar (TB) generan en forma deficiente la población CD1a+/CD14- durante su diferenciación in vitro. La presencia de Mtb al inicio del proceso de diferenciación induce tanto en TB como en dadores sanos, una población CD1a-/CD14low/CD86high que no expresa DC-SIGN, receptor para Mtb característico de DC, con baja capacidad linfoproliferativa. El objetivo de este trabajo fue evaluar los mecanismos que ejerce el Mtb en la generación de dicha población de tipo macrofágica. Para esto, a partir de Mo de sangre periférica separados por adherencia se generaron in vitro DC, con IL-4 y GM-CSF durante 6 días sin estímulo inicial o en presencia de Mtb (relación 2:1 Mtb:Mo), IL-10 (20 ng/mL) o el ligando de TLR2, Pam3Cys (180 ng/mL). Posteriormente se determinó la expresión de CD1a, CD14, CD86, DC-SIGN, CD1b por citometría de flujo y la proliferación específica por medio de la incorporación de 3H-timidina (18 hs) enfrentándose las CPA con linfocitos autólogos, durante 5 días a 37ºC. Resultados: La presencia de Mtb durante la diferenciación inhibe la expresión del CD1a, conservando la expresión de CD14 (p<0.005), mientras que Pam3Cys e IL-10 reproducen sólo parcialmente el efecto inducido por el Mtb. En particular, IL-10 resultó ser un fuerte inductor de CD14 (p<0.05). Pam3Cys e IL-10 no generan la población CD86high/DC-SIGN- característica del Mtb, pero sí reducen la capacidad de CPA (p<0.05). Conclusión: El efecto inhibitorio del Mtb sobre la diferenciación de Mo a DC estaría mediado en parte por la secreción de IL-10 y la activación de TLR2,  generando a su vez CPA de fenotipo DC-SIGN-, sugiriendo un mecanismo de evasión de la respuesta inmune.