Potenciales blancos moleculares del AML1 en la patogenia del desorden plaquetario familiar (DPF/LMA).

GLEMBOTSKY AC.; LEV PR.; KORIN L.; SALIM JP.; MARTA RF.; MOLINAS FC.; HELLER PG.

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; XIX Congreso Argentino de Hematología; 2009

Sociedad Argentina de Hematologia

El DPF/LMA se caracteriza por trombocitopenia,disfunción plaquetaria,predisposición a leucemia y mutación del factor de transcripción AML1. Los mecanismos involucrados en la disfunción plaquetaria son controvertidos refiriendo en diferentes familias, enfermedad de pool de depósito o defecto en la activación de la GPIIbIIIa (inside-out). Para evaluar la contribución de ambos mecanismos, estudiamos en 4 pacientes de una familia el contenido y liberación de gránulos  y densos() y la activación de GPIIbIIIa. Se halló alteración del contenido de gránulos  (mepacrine) en 3/4 pacientes, de la liberación de ATP en 3/3, de la expresión de P-selectina (citometría de flujo) en 2/3. La microscopía electrónica mostró disminución de ambos gránulos en 2/2. No se halló alteración en la retracción del coágulo ni del spreading (inmunofluorescencia con faloidina),sugiriendo indemnidad del outside-in. Para evaluar potenciales blancos del AML1 en estas alteraciones, estudiamos moléculas que participan en la biogénesis de gránulos(Rab27b, HPS-1), en la activación de GPIIbIIIa (CalDAG,Rap1b) o en ambos (NF-E2) por PCR tiempo real y/o Western blot. Se halló disminución de Rab27b y Rap1b, sin alteración de CalDAG y HPS-1. Respecto al NF-E2, se halló disminución de ARNm isoforma f, siendo la isoforma a normal, los niveles proteicos totales resultaron normales. En conclusión, el pool de depósito α y el defecto en la activación de GPIIbIIIa contribuyen a la disfunción plaquetaria del DPF/LMA, si bien la participación relativa de ambos mecanismos fue variable entre los pacientes. La disminución de Rap1b y Rab27b podrían tener un rol en estas alteraciones, sugiriendo que AML1 modula la GPIIbIIIa mediante la regulación de Rap1b y la biogénesis granular, mediante Rab27b aunque se requieren estudios funcionales para confirmar esta hipotesis. Un estudio exhaustivo de la expresión génica en los pacientes permitiría identificar otros blancos del AML1 en la función y producción plaquetaria.