Alteraciones morfológicas en la producción de proplaquetas como factor contribuyente a la disminución del recuento plaquetario en la trombocitopenia inmune primaria

GRODZIELSKI M.; LEV PR.; GOETTE NP.; GLEMBOTSKY AC.; ESPASANDIN YR.; PIERDOMINICI MS.; MOLINAS FC.; HELLER PG.; MARTA RF.

Jornada; XII Jornadas Científicas del Instituto Alfredo Lanari; 2013

La trombopoyesis es un proceso celular único por el cual los megacariocitos (MK) maduros emiten prolongaciones citoplasmáticas denominadas proplaquetas (PP), que se elongan, ramifican y desprenden de sus extremos a las plaquetas nacientes, consumiendo el citoplasma celular. Este proceso ocurre en el nicho vascular de M.O., donde los MK extienden las PP a través de la barrera endotelial, liberando las plaquetas a circulación. En este trabajo se evaluó la arquitectura de las PP de MK normales incubados con plasma de pacientes con trombocitopenia inmune primaria (PTI). Progenitores CD34+ de sangre de cordón umbilical se cultivaron hasta obtener MK normales maduros (día 13 de cultivo), momento en el cual se trasvasaron a pocillos conteniendo vidrios recubiertos con fibrinógeno (200 ug/ml) a los que se les adicionó 10% de plasma de pacientes con PTI (n=12) o controles normales (n=12). Luego de 48 horas de cultivo, se fijaron y marcaron con anti-CD61-FITC y Hoecsh, realizándose el análisis morfológico de los MK produciendo PP sobre fotografías tomadas en un microscopio de epi-iluminación, utilizando un software de análisis celular. En cada MK produciendo PP, se evaluó el número de PP, número de engrosamientos a lo largo de las PP (swellings), número de terminaciones (tips), de bifurcaciones, y las medidas de longitud y ancho máximo de las PP (tabla) Parámetro Pacientes Controles P Nº PP/MK 1,28±0,13 1,48±0,10 0,0004 Nº swellings/MK 0,74±0,59 1,90±0,68 0,0002 Nº tips/MK 1,65±0,46 2,27±0,35 0,0115 Nº bifurcaciones/MK 0,37±0,34 0,81±0,27 0,002 Longitud PP (um) 31,67±13,50 44,97±10,09 0,012 Ancho máximo (um) 3,29±0,37 2,58±0,43 0,0003 Los MK incubados con plasma de PTI produjeron menos PP, más cortas y engrosadas, con menor cantidad de swellings y de tips. En resumen, las PP formadas en presencia de plasma de PTI fueron menos complejas que las de los controles. Estos resultados sugieren que: a) cada MK produciría menos cantidad de plaquetas en la PTI; b) la morfología particular de las PP podría entorpecer el pasaje de las mismas a través de la barrera endotelial. Ambos factores contribuirían a la trombocitopenia característica de la PTI.