ESTUDIO DE DROGAS ANTINEOPLÁSICAS COMO POSIBLES POTENCIADORES DE LA TERAPIA GENICA EN CÉLULAS DE MELANOMA FELINO Y CANINO

AGNETTI, L; VILLAVERDE M. S.; GLIKIN G.C.; FINOCCHIARO LME

CABA

Jornada; Jornadas anuales Instituto Roffo; 2015

Objetivo: Estudiar el potencial terapéutico de la geno-terapia en combinación con drogas antineoplásicas enlíneas celulares de melanoma mucoso felino y canino.MyM: Se utilizaron 4 líneas celulares de melanoma maligno (2 felinas: Dc y Rn, y 2 caninas: Bk y Rk) establecidas a partir de tumores espontáneos provenientes de pacientes veterinarios. Se lipofectaron con los genes ß-galactosidasa (bgal), interferón beta (cIFNb y feIFNb, canino y felino respectivamente) o sistema de gen suicida HSVtk/GCV (GS). Luego de 24 horas se resembraron como monocapas o esferoides (sobre agar), con el agregado o no de bleomicina (BLM) (3µg/ml) o dicloroacetato (DCA) (10 mM). A los 6 (monocapa) o 12 días (esferoides), se determinó la viabilidad celular (por APH: fosfatasa ácida).Resultados: Todas las líneas evaluadas resultaron sensibles a la terapia génica con IFN-ß o GS al ser cultivadas como monocapas (mc), observándose un mayor efecto del gen IFN-ß para las líneas felinas (Rn:64,7±5,5% y Dc:37,0±6,0%) y del GS en el caso de las caninas (Bk:12,0±1,9% y Rk:9,6±2,4%) (p0,001). Esta respuesta se mantuvo en Rn, Dc y Bk cuando fueron cultivadas como esferoides (esf), siendo significativo el efecto de ambos genes en las líneas caninas (p0,001), pero sólo de IFN-ß para las líneas felinas Rn y Dc (p0,01).Las drogas BLM y DCA demostraron poseer un gran efecto per se sobre ambas líneas felinas, disminuyendo significativamente la sobrevida de las monocapas con respecto al tratamiento genético en todos los casos, y de los esferoides en el caso de Dc. En esta última, las combinaciones IFNb + DCA (tanto en mc como en esf) e IFNb + BLM (sólo en mc) mostraron un efecto aditivo significativo respecto de todos sus controles (p0,05). Por otro lado, la combinación IFN-ß + BLM fue la única que logró este efecto sobre los esferoides de Rn (p0,05).Debido a la elevada respuesta de Bk y Rk al GS, la citotoxicidad generada no varió significativamente al combinarse con BLM o DCA. Un efecto sumatorio significativo se evidenció en ambas líneas cuando se combinaron IFN-ß y DCA (p0,05). La citotoxicidad producida por la lipofección de los genes terapéuticos sobre esferoides aumentó en presencia de BLM o DCA, sin embargo, este incremento no resultó significativo en ningún caso.Conclusión: El tratamiento génico disminuye significativamente la sobrevida de todas las líneas evaluadas. Drogas como la bleomicina o el dicloroacetato podrían aumentar la efectividad del gen del IFNb, siendo menor su potencial en combinación con el sistema de GS.