Estudio de drogas antineoplásicas como posibles potenciadores de la terapia genica en células de melanoma felino y canino

AGNETTI, L; VILLAVERDE MS; GLIKIN GC; FINOCCHIARO LME

Mar del Plata

Congreso; Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clinica; 2015

En el presente trabajo se propuso estudiar el potencial terapéutico de la geno-terapia en combinación con bleomicina (BLM) o dicloroacetato (DCA) en 4 líneas celulares de melanoma mucoso felino (Dc y Rn) y canino (Bk y Rk) establecidas en nuestro laboratorio. Todas las líneas resultaron sensibles a la terapia génica cuando se lipofectaron las monocapas (mc) con los genes del interferón beta (cIFNb y feIFN-ß, canino y felino respectivamente) o sistema de gen suicida HSVtk/GCV (GS), observándose un mayor efecto del IFNb para las líneas felinas y del GS en el caso de las caninas (p0,001). Al cultivarse como esferoides (esf), todas las líneas mantuvieron la sensibilidad al IFNb, a diferencia de lo observado con el GS, sólo efectivo en el caso de Bk (p0,01). La necesidad de un umbral de células que expresen el transgen y la baja lipofección de las líneas felinas podrían explicar la ineficacia del GS observada en los esf de estas líneas. Las drogas BLM yDCA generaron un gran efecto per se sobre Rn (mc) y Dc (mc y esf), disminuyendo significativamente la sobrevida respecto del tratamiento genético. En esta última, ambas drogas potenciaron el efecto del IFN-ß (p0,05). La combinación IFN-ß + BLM fue la única que logró este efecto sobre los esferoides de Rn (p0,05). Debido a la elevada respuesta de Bk y Rk al GS, la citotoxicidad no varió al combinarse con BLM o DCA. Un efecto sumatorio significativo se evidenció en ambas líneas cuando se combinaron IFN-ß y DCA (p0,05). La eficiencia de lipofección alcanzada en las 4 líneas fue menor al efecto citotóxico de los genes, lo cual podría evidenciar un efecto bystander. Se observó una correlación entre dicho efecto y los niveles intracelulares de ROS cuando fueron determinados por citometría (DCF). Por lo tanto, el tratamiento genético con IFNb fue altamente efectivo como terapia antitumoral in vitro. Drogas como BLM o DCA podrían aumentar su citotoxicidad, siendo menor su potencial en combinación con el sistema de GS.