EFECTO DE LA PRODUCCIÓN DE INTERFERON BETA POR CELULAS TRANSGENICAS TUMORALES.

VILLAVERDE, M. S; KARARA, A. L.,; GLIKIN, G. C.; FINOCCHIARO, L. M. E.

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LI Reunion Cientifica de la Sociedad Argentina de Investigación Clinica y LIV Reunion Cientifica de La Sociedad de Inmunologia; 2006

SAIC

Efecto de la producción de INTERFERON beta por celulas transgenicas tumorales. Villaverde, M. S., Karara, A. L., Glikin, G. C. y Finocchiaro, L. M. E. Unidad de Transferencia Genética, Instituto de Oncología “Ángel H. Roffo”, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina. E-mail: utgroffo@yahoo.com.ar Mediante la transferencia del gen de interferón tipo 1 (IFN) se pretende lograr la alta efectividad antitumoral demostrada por su proteína, evitando la toxicidad sistémica  de la misma. En este trabajo proponemos evaluar el efecto de la transfección, mediante liposomas cationicos, del plasmido portador del gen de IFNβ (pCMVh IFNβ) solo o combinado con otras citokinas, sobre monocapas o esferoides multicelulares de: i) sarcoma de Ewing (EW7 y COH), ii) adenocarcinoma de mama (MCF-7) y iii) adenocarcinoma de colon (HT-29). La respuesta se correlacionara con la producción de IFN  por las células tratadas, y se comparara con el efecto del agregado exógeno de la proteína IFN (1-10000 UI/ml). Por ultimo se determinara si existe una sensibilidad diferencial a la respuesta del gen IFN con respecto al sistema del gen suicida  TK/GCV. Los resultados obtenidos mostraron que todas las líneas evaluadas fueron sensibles a la terapia genética con  INFb (p<0,01), efecto no potenciado por la combinación con otras citokinas. Ninguna de las lineas respondieron al tratamiento con TK/GCV. Los esferoides multicelulares mostraron un efecto significativamente menor (p<0.01) que sus respectivas monocapas. Las células transfectadas liberaron al medio de cultivo entre 1200 y 2600 UI/ml de IFNb. Por otro lado, el agregado exógeno de 3 pulsos de la proteína IFN en ninguna de las concentraciones estudiadas fue mayor que el obtenido con el gen IFNb. Por último, la citometría de flujo reflejó el efecto necrótico/apoptótico del gen IFNb obteniéndose hasta un 80% de la población en esta ventana. Concluimos que: i) la terapia génica con IFNb tiene significativos efectos citotoxicos en todas las líneas evaluadas, ii) la terapia génica con IFNb  podría ser una buena opción de tratamiento en tumores que no responden al sistema TK/GCV , iii) el aumento en el numero de pasajes y la conformación tridimensional del cultivo disminuye la sensibilidad al gen IFNb y iv) en este último caso, la terapia génica con TK/GCV podría ser una buena opción para tratamiento de tumores que no responden al IFNb.