INVESTIGADORES
DE LA TORRE Fernando Roman
congresos y reuniones científicas
Título:
Efectos pro y antioxidantes de un nanocompuesto (c60) em hepatocitos de zebrafish (Danio rerio)
Autor/es:
LONNE, M.N.; SOARES CHAVES, I; DE LA TORRE, F.R.; MONSERRAT, J.M.
Lugar:
Lima, Peru
Reunión:
Congreso; . IX Congress of the Society of Environmental Toxicology and Chemistry in LatinAmerica; 2009
Resumen:
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El empleo creciente de nanocompuestos em diversos procesos industriales
y de aplicación tecnológica no ha sido acompañado de estudios sobre los
impactos potenciales en sistemas biológicos. Evidencias recientes muestras
divergencias en los efectos inducidos por nanocompuesto como el fulereno (C60),
particularmente en lo concierne a parámetros de estrés oxidativo. El presente
trabajo tuvo como objetivo analizar respuestas tóxicas en hepatocitos de
zebrafish (Danio rerio, línea ZFL) expuestos
al nanocompuesto fulereno durante 4 h. Fue realizada una solución stock de
fulereno (200 mg/L) por agitación durante 2 meses, sin utilizar ningún tipo de
solvente. Los hepatocitos fueron mantenidos a 28 oC en medio RPMI
con 10% de suero fetal bovino y 1% de antibiótico y antimicótico. Las
concentraciones de C60 ensayadas fueron de 0,1; 1 y 10 mg/L, con un
tiempo de exposición de 4h, al fin de la cual fueron medidos el número total de
células, la viabilidad celular y la producción de especies activas de oxígeno
(EAO). El número de células fue estimado por absorbancia en 630 nm, la
viabilidad por reducción de MTT (490 nm) y los EAO por fluorescencia a través
de la oxidación del substrato H2DCF-DA (ex.: 480 nm; em.: 520 nm),
siendo luego relativizado por el número de células viables. Los resultados
obtenidos mostraron que: (a) ni el número de células ni la viabilidad celular
fueron afectadas por la exposición exposición al C60 (p>0,05);
(b) la [EAO] tuvo una respuesta dual, siendo significativamente menor (p,0,05)
que el control en la menor concentración (0,1 mg/L) y aumentada en las otras
dos concentraciones (1 y 10 mg/L) (p<0,05). Los resultados obtenidos
permiten indicar que las respuestas aparentemente contradictorias inducidas por
el fulereno pueden en realidad estar muy relacionadas con la concentración. El
hecho de que la reducción del MTT es considerada por muchos autores como una
medida de la funcionalidad mitocondrial parece indicar que no es esta la fuente
de aumento de EAO intracelular. Finalmente el protocolo experimental de 4h
mostró ser el más efectivo para evidenciar respuestas celulares al C60.
Apoyo financiero: CAPES (Programas PROCAD e PNPD) e CNPq
(Programa Universal, PROSUL e INCT), Brasil. ANPCyT-PICTRAICES (proceso 35913),
Argentina.
