Uso de la técnica de PCR para caracterizar aislados de subgénero viannia en pacientes con Leishmaniasis

BARRIO A; MARCO D; SOLER G; CORRALES M; MORA MC; PÉREZ BRANDÁN C; CARDOZO R; BASOMBRÍO MA; SEGURA MA

Mendoza, Argentina

Congreso; VII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2005

Sociedad Argentina de Protozoología

El norte de Salta es zona endémica de Leishmaniasis Tegumentaria Americana (LTA). Las formas clínicas encontradas se caracterizan como lesiones cutaneas simples o multiples, mucocutaneas o mucosas, formas diseminadas y recurrentes. Los parásitos causantes descriptos hasta el momento, pertenecen a los subgéneros Vianna y Leishmania. Existen numerosos metodos para dectectar los complejos y especies de Leishmania, como técnicas de isoenzimas y moleculares. En este trabajo desarrollamos una PCR utilizando un par de primers LU-5A y LB-3C que amplifican una región de gen del mini-exon y generan un producto de 150 bp para los miembros del subgénero Vianna. Se optimizaron diferentes parámetros y se probó la especificidad de la reacción con cepas de referencia de la OMS. Luego se realizo la caracterización de 5 aislados de pacientes que habian sido caracterizados con primers genéricos 13A y 13B. Los resultados obtenidos muestran un 100% de especificidad, ya uqe solo emplificaron las cepas de referencia correspondiente a los complejos Brasiliensis y guyanensis, mientras que las cepas correspondientes a los complejos mexicana e infantum mostraron rsultados negativos. Los aislados de pacientes dieron positivos, en pacientes de Salta y negativo para un paciente del Amazonas, este aislado podria ser compatible con el complejo mexicana. Esta PCR es util para la caracterizacion rapida de aislados de pacientes en cultivo para completar el diagnostico y determinar regimenes terapeuticos adecuados.