Estudio en tiempo real de la inserción de alfa-hemolisina en dominios líquido desordenado de membrana

M. ELENA VELA; S.MATÉ; V. HERLAX; R. VAZQUEZ; A.DAZA-MILLONE; MARÍA LAURA FANANI; BRUNO MAGGIO; L.BAKÁS

Congreso; 12th Interamerican Microscopy Congress; 2013

Las bacterias patogénicas frecuentemente secretan toxinas que son proteínas solubles en agua que se pueden insertar en las membranas celulares y formar poros (1). Muchas de estas toxinas constituyen factores patológicos críticos y algunas son empleadas para aplicaciones biotecnológicas (2). La toxina α-hemolisina de Escherichia coli (HlyA) es un miembro de la familia de las proteínas formadores de poros que provoca numerosas respuestas en las células de mamíferos y altera la permeabilidad de las membranas de las células huésped, causando su ruptura y la muerte celular (3), (4). No se conoce demasiado sobre el mecanismo mediante el cual ocurre este proceso. En este trabajo se muestran por una parte los resultados inherentes a la interacción entre HlyA y la membrana observando la inserción de la toxina en monocapas lipídicas mediante microscopía de ángulo de Brewster (BAM). También se observó en tiempo real mediante AFM en medios líquidos la interacción de HlyA con bicapas lipídicas soportadas. Estos estudios permiten corroborar la inserción preferencial de la toxina en las fases liquida desordenada (ld) y la aparición de defectos en la fase líquida ordenada (lo), como también el rol de los defectos en los bordes de dominios como sitios iniciales de anclaje.