DISEÑO DE UN SENSOR PLASMÓNICO PARA LA DETECCIÓN DEL VIRUS DEL DENGUE MEDIANTE EL USO DE NANOANTICUERPOS

STEFONI, CELINA ; BENAVIDES, LEANDRO; IBAÑEZ, ITATÍ; MURGIDA, DANIEL; CASTRO, MARÍA ANA

Calafate

Congreso; XXIII Congreso Argentino de Fisicoquímica y química Inorgánica; 2023

Este trabajo es motivadopor la creciente necesidad de desarrollar métodos de diagnóstico clínico y monitoreoambiental que sean sensibles, fiables, eficientes y económicos. En particular, elbiosensor en estudio es un nanobiosensor híbrido cuyo sistema de detección es laespectroscopía Raman intensificada por superficies (SERS, por  sus siglas en inglés). El biosensor cuenta conuna nanoestructura y con un nanoanticuerpo (NAb) como elemento debioreconocimiento. Un nanoanticuerpo es el mínimo fragmento funcional con capacidadde unión al antígeno con alta especificidad y afinidad. La ventaja del uso deéstos frente al uso de anticuerpos monoclonales es su mayor estabilidad y su menorcosto de producción debido a que se pueden expresar en E. Coli. Lananoestructura utilizada es una nanoestrella de Au recubierta con Ag (AuNS@Ag),que permite la intensificación de las señales Raman de la molécula sonda adsorbidasobre estas. Las sondas seleccionadas son ácidos mercaptobenzoicos (MBA), tanto2-MBA como 4-MBA. La nanoestructura (AuNS@Ag) con la sonda ya adsorbida es recubiertacon SiO2 y funcionalizada con nanoanticuerpos.Los nanoanticuerpos utilizados sonespecíficos contra la proteína NS1 del virus del dengue. De manera de lograr unamejor reproducibilidad, se ensayaron distintas estrategias de inmovilización mediantela derivatización del elemento de reconocimiento.La estrategia de sensadoconsiste en depositar la muestra sobre un sustrato de Au funcionalizado con nanoanticuerposy luego agregar la nanoestructura. En presencia de antígeno en la muestra, la nanoestructuraquedará unida a la superficie de Au mediante el antígeno. Por lo tanto, lasuperficie tendrá la señal SERS de la molécula sonda. Se realizaron medicionesSERS del sistema descripto con 4-MBA y se logró detectar una concentración deantígeno (0.145 μg/mL) dentro del rango clínicamente relevante (0.04 a 2μg/mL).