Análisis de un gen involucrado en la resistencia a insecticidas en el vector de la enfermedad de Chagas, Triatoma infestans

VARELA, GM; STROPPA, MM; GROSSO, CG; GARCIA, BA

Jornada; XVIII Jornadas de Investigación Científica; 2017

Los programas de control de la transmisión de la enfermedad de Chagas promueven la eliminación de las poblaciones del insecto vector Triatomainfestans mediante la fumigación con insecticidas piretroides. Sin embargo, se han observado fallas en el control debido a la existencia de resistencia a los insecticidas. Incrementos en la expresión a nivel de la transcripción de genes de citocromos P450 son frecuentemente considerados responsables de aumentar el metabolismo de insecticidas y parece ser un fenómeno común en la evolución del desarrollo de resistencia en insectos. Con el propósito de investigar la participación de los citocromos P450 en la resistencia a insecticidas en T. infestans, se aisló el ADN copia (ADNc) del gen NADPH citocromo P450 reductasa (CPR) que codifica para una enzima involucrada en la transferencia de electrones desde la forma reducida de NADPH a los citocromos P450. A partir de la secuencia de ADNc del gen se diseñaron primers específicos y una sonda Taqman para la determinación de su expresión, mediante la técnica de PCR en Tiempo Real, en músculo, cabezas, gónadas y cuerpo graso de ninfas V y adultos. Las gónadas y cuerpo graso presentaron niveles significativos de expresión en ambos estadios. Se observó mayor nivel de expresión del gen CPR en gónadas de ninfas que en adultos. Mientras que en cuerpo graso se detectó un nivel de expresión más elevado en adultos. Además, se analizaron sus niveles de expresión en cuerpo graso de ninfas V de una colonia susceptible de laboratorio en distintos intervalos de tiempo después de la aplicación tópica de la dosis letal 50% del principio activo deltametrina. Los niveles de ARNm del gen CPR se incrementaron después de la aplicación del insecticida en relación a lo detectado en los individuos no expuestos. Por otra parte, el análisis comparativo de la expresión del gen CPR en insectos provenientes de diferentes poblaciones,reveló sobre-expresión en la población que presentó el mayor grado de resistencia al insecticida. Los resultados obtenidos apoyarían la hipótesis que postula la participación de los citocromos P450 en el desarrollo de la resistencia a insecticidas piretroides en T. infestans.