IDENTIFICACIÓN Y ESTUDIOS DE EXPRESIÓN DEL GEN RELOJ PERIOD EN INSECTOS VECTORES DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS

MARÍA MERCEDES STROPPA, IGNACIO GIMENEZ, CARLOTA CARRIAZO, BEATRIZ A GARCÍA

Buenos Aires

Congreso; Sociedad Argentina de Protozoología - XXVII Reunión Anual; 2015

Las actividades y procesos fisiológicos responden a ritmos biológicos oscilatorios fundamentales, en los que los genes reloj están implicados. Con el propósito de realizar estudios moleculares del reloj circadiano en insectos vectores de la enfermedad de Chagas, se inició el estudio con la identificación y análisis de la secuencia del gen reloj period (per) en el genoma de Rhodnius prolixus mediante la utilización de herramientas bioinformáticas. Posteriormente se amplificó un fragmento de 200 pb del gen per en Triatoma infestans y R. prolixus con el que se llevó a cabo un análisis filogenético con otras especies de insectos. Por otra parte, se determinó su patrón de expresión diaria a nivel de transcripción por RT-PCR semicuantitativa en tejido nervioso de T. infestans adultos, bajo condiciones de fotoperíodo (LO) y luz constante (LL). En el genoma de R. prolixus se identificaron 11 regiones codificantes correspondientes al gen per que presentan un 50% de homología con respecto a otras especies de insectos. En las secuencias de aminoácidos deducida de esas regiones se identificaron dominios conservados de importancia funcional. El árbol filogenético agrupó a T. infestans y R. prolixus con otras especies de hemípteros, Riptortus pedestris y Pyrrhocoris apterus. El patrón de expresión del gen per a nivel transcripcional mostró un pico al atardecer en el grupo LO, no observándose diferencias significativas en relación al sexo. Este aumento de ARNm del gen per concuerda a lo descripto en Drosophila melanogaster y sería compatible con la oscilación diaria en los niveles de la proteína PER encontrada por otros autores en R. prolixus. Por otra parte, ni en machos ni en hembras del grupo LL se observaron cambios en los niveles de expresión del gen per. Este resultado evidencia la acción disruptiva de la luz sobre el ritmo de transcripción del gen per.