LA PROTEÍNA HSP83 DE Leishmania infantum USADA COMO CARRIER MEJORA LA EXPRESIÓN DEL ANTÍGENO SAG1 DE Toxoplasma gondii EN PLANTAS

ALBARRACÍN, ROMINA M; LAGUÍA BECHER, MELINA; FARRAN, INMACULADA; SANDER, VALERIA A; CORIGLIANO, MARIANA G; YACONO, MARIA L; PARIANI, SEBASTIÁN A; SANCHEZ, EDWIN F; VERAMENDI, JON; CLEMENTE, MARINA

Congreso; XXVII REUNIÓN ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE PROTOZOOLOGÍA; 2015

SAG1  es  el  principal  antígeno  de  superficie  del  parásito  intracelular  Toxoplasma  gondii,  que  ha  sido  propuesto  como  uno  de  los  principales  candidatos  para  el  desarrollo  de  una  vacuna  anti  T .  gondii.  En  estesentido es que se han realizado grandes esfuerzos por expresar este antígeno en diferentes sistemas heterólogos, que en la mayoría de los casos resultaron en bajos niveles de expresión y baja antigenicidad dela  proteína  recombinante.  En  el  presente  trabajo  nos  propusimos  explorar  la  tecnología  de  transformación  de  cloroplastos  con  el  objeto  de  optimizar  la  expresión  SAG1  en  plantas.  Además,  con  el  propósito  demejorar la expresión de SAG1 en cloroplastos, se expresó la proteína de choque térmico de 83kDa de Leishmania infantum (LiHsp83) como carrier del antígeno SAG1. Los niveles de SAG1 en plantas  fue entre0,1-0,2  μg/g  de  peso  fresco  (PF).  Por  su  parte,  la  fusión  de  SAG1  a  LiHsp83  incrementó  significativamente  los  niveles  de  expresión  de  SAG1  en  cloroplasto  (~100  μg/g  de  PF).  Además,  se  evaluó  lafuncionalidad  de  la  proteína  fusión  LiHsp83-SAG1.  Tres  sueros  seropositivos  de  pacientes  reaccionaron  contra  la  proteína  SAG1  presente  en  plantas  que  expresaban  la  proteína  de  fusión  LiHsp83-SAG1.Asimismo,  las  inmunizaciones  orales  de  ratones  C57  utilizando  extractos  de  plantas  que  expresaban  LiHsp83-SAG1  redujeron  significativamente  el  número  de  quistes,  que  correlacionó  con  un  aumento  en  losniveles  de  anticuerpos  específicos  anti-SAG1.  Es  por  estos  resultados  que  proponemos  que  la  fusión  de  proteínas  foráneas  a  la  proteína  LiHsp83  de  L. infantum  como  una  estrategia  novedosa  para  incrementarlos niveles de expresión de proteínas recombinantes expresadas en cloroplastos, proporcionando una alternativa a las dificultades que presenta la expresión de un antígeno en sistemas heterólogos de plantas.