Efecto de acetilcolina endógena sobre la migración de células dendríticas y monocitos hacia células trofoblásticas humanas y contribución a un ambiente tolerogénico

DANIEL PAPARINI, SOLEDAD GORI, ESTEBAN GRASSO, WALTER SCORDO, ROSANNA RAMHORST, GABRIELA SALAMONE, CLAUDIA PÉREZ LEIRÓS.

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y de la LX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2012

La generación y desarrollo de la interfase materno-placentaria es un proceso dinámico que involucra la acción concertada de células y mediadores favoreciendo un ambiente tolerogénico. Células dendríticas (CD) y macrófagos, son reclutados y ?educados? por células trofoblásticas (Tb) para promover el crecimiento fetal. Las células inmunes y la placenta presentan un sistema colinérgico no neuronal, sin embargo, su participación en la inducción del ambiente tolerogénico en la interfase temprana no se ha aclarado aún. Nuestro objetivo fue evaluar el efecto de acetilcolina (ACh) endógena en la interacción de Tb con CD y monocitos (Mo). Se purificaron Mo de sangre periférica de mujeres voluntarias sanas en edad reproductiva por técnicas inmunomagnéticas (pureza >95%). Para obtener CD, los Mo se diferenciaron 5 días con IL-4/GM-CSF. Se evaluó la expresión de colina acetil transferasa (ChAT), acetilcolinesterasa (AChE) y receptores muscarínicos M1-M5 en la línea celular trofoblástica Swan-71 por RT-PCR y WesternBlot. Mediante co-cultivo de células inmunes con Tb, se analizó la migración de CD y Mo hacia Tb, su interacción, y el efecto de ACh endógena por citometría y detección de MCP-1, IL-10 y TNF-α por ELISA. Observamos que Tb expresa ChAT, AChE y los 5 subtipos de receptor. La neostigmina (Neo) 20 uM aumentó la producción de IL-10 en Tb, sin variar TNF-α ni MCP-1. En la interacción Tb-CD se observó aumento de IL-10 y aumento de MCP-1 inducido por Neo. El medio condicionado (MC) de Tb indujo migración de CD (X±ES: 3.674±193 vs 413±104 cél/90 min; P