Contribución de VIP a la inducción y reclutamiento de células T regulatorias en un modelo in vitro de interacción materno-placentaria

L. FRACCAROLI; E. GRASSO; V. HAUK; G. MOR; C. PÉREZ LEIRÓS; R. RAMHORST

Tucumán

Congreso; LVIIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2011

Sociedad Argentina de Inmunología

La preñez involucra distintas fases inmunológicas con perfiles inflamatorios y anti-inflamatorios. El control de los mismos implica diversos mecanismos regulatorios, como la inducción de  células T regulatorias (iTreg). Por otra parte, el péptido intestinal vasoactivo (VIP) es producido por células trofoblásticas y modula el balance de dichos mediadores. En este trabajo evaluamos la contribución de VIP en la diferenciación de células iTreg y su capacidad de  reclutarlas hacia la interfase materno-placentaria. Para ello, realizamos cocultivos de 48h de células mononucleares de mujeres fértiles y células trofoblásticas como modelo in vitro de diálogo materno-placentario. VIP (10-7M) aumentó significativamente la frecuencia de células CD4+CD25+Foxp3+ y este efecto se previno con su antagonista específico (p<0.05). Más aun, estas células suprimieron significativamente la proliferación de linfocitos aloactivados (p<0.05). Además, en cocultivos con VIP aumentó significativamente el porcentaje de células CD4+IL-10+ (1.9±0.2 vs 25±3) mientras que no se moduló la producción de IFNγ e IL-17. Para evaluar los mecanismos involucrados en la diferenciación de las Tregs, primero determinamos que el medio condicionado de las células Swan-71 contiene VIP y altos niveles de TGFβ1 y 2. En ensayos de transwells (0.4um) determinamos que el aumento en la frecuencia de CD4+CD25+Foxp3+ es dependiente de la forma soluble de TGFβ ya que se previene su diferenciación en presencia del Ac. neutralizante anti-TGFβ y del antagonista de VIP. Finalmente, a través de un modelo de diferenciación de iTreg in vitro a partir del LT CD4 vírgenes de mujeres fértiles cultivados 5 días en presencia de IL-2 y TGFβ, se evaluó la capacidad de VIP de atraer iTregs hacia células Swan-71. Para esto se utilizaron sistemas de transwell (8um) y observamos que las Swan-71 fueron capaces de reclutar selectivamente iTregs y VIP aumentó este efecto luego de 48h. Concluimos que VIP tendría un papel activo en la inducción y reclutamiento de iTreg, contribuyendo al proceso de inmunoregulación de la interfase materno-placentaria.