Ensayo de susceptibilidad a Metronidazol en aislamientos de T. foetus por citometría de flujo

RIVERO MB; LUQUE ME; ABDALA ME; DI LULLO D; LUNA BE; CARRANZA PG; RIVERO FD

RESISTENCIA

Congreso; XXX Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Protozoologia; 2018

SAP

LaTricomonosis Bovina, enfermedad parasitaria del tracto urogenital bovino, es causada por el protozoario flageladoTritrichomonas foetus (T. foetus). Se disemina por transmisiónsexual y representa un problema sanitario cuando se utiliza el servicio naturalcomo método reproductivo. La patología ocasiona grandes pérdidas económicasdebido a la disminución de la tasa de preñez por infertilidad transitoria o lapresencia de abortos. La terapia con fármacos no siempre es aconsejable debidoal reporte de fallas en el tratamiento y a la aparición de resistencias (aeróbicasin vivo y anaeróbicas in vitro), por lo que se opta por lafaena del animal infectado. La droga más utilizada es el Metronidazol (Mz) ysus derivados. La susceptibilidad a Mz en este protozoario ha sido investigadamediante metodologías que se basan en la observación de la movilidad delparásito a través del microscopio óptico luego ser sometidos al efecto de ladroga; siendo técnicas laboriosas, lentas y subjetivas. Hasta la fecha no sehan reportado valores de IC50 (mitad -50%- de la concentracióninhibidora mínima) a las 48 hs para Mz en T. foetus. La citometría de flujo es un método eficiente, rápido ysensible que permite la automatización de la técnica y aumenta la objetividad. Elobjetivo del trabajo fue obtener valores de IC50 de Mz a las 48 hs in vitro bajo dos condiciones diferentes(anaerobiosis (ANC) y aerobiosis (AC)). Para ello se incubaron 6 aislamientos de T. foetus con concentraciones seriadasde Mz durante 48hs en aerobiosis y en bolsas para anaerobiosis por triplicado.Finalizado ese período se marcaron con FDA (di acetato de fluoresceína), para observarlos parásitos vivos, y luego fueron contados utilizando un citómetro de flujo. Losresultados obtenidos fueron de 1,06 a 1,25 µM en ANC y de 1,44 a 3,03 µM en AC y representan  los únicos valores de IC50reportados en este protozoario a las 48 hs. además, la citometría de flujo demostróser una técnica  eficaz, rápida y útilpara realizar ensayos cuantitativos de susceptibilidad en estos protozoarios.Esta información resulta importante para la planificación de tratamientos,teniendo en cuenta la variabilidad biológica de los aislamientos de esteparásito, y constituye una herramienta fundamental para el control de la enfermedad.