Estudios preliminares de citotoxicidad e inducción de apoptosis del extracto acuoso caracterizado de Achyrocline satureioides (Lam.) DC

SABINI MARÍA CAROLA; CARIDDI LAURA NOELIA; ESCOBAR FRANCO MATÍAS; REINOSO ELINA; CRISTOFOLINI ANDREA; COMINI LAURA; MERKIS CECILIA; ZANON SILVIA MATILDE; SERENO JOSÉ LUIS; CANTERO JUAN JOSÉ; SABINI LILIANA INÉS

ROSARIO

Congreso; XI SIMPOSIO ARGENTINO XIV SIMPOSIO LATINOAMERICANO DE FARMACOBOTÁNICA I CONGRESO LATINOAMERICANO DE PLANTAS MEDICINALES; 2013

SILAE

Introducción: Numerosas especies vegetales se utilizan tradicionalmente con fines medicinales. Achyrocline satureioides posee varias bioactividades, tales como: antiinflamatoria, hepatoprotectora, antioxidante y antiviral. Previamente, demostramos que el extracto acuoso frío (EAF) de A. satureioides inhibió al virus de la Encefalitis Equina del Oeste. Resulta necesario evaluar el poder tóxico, y la capacidad de inducir apoptosis de EAF. Objetivo: Estudiar el potencial citotóxico y apoptótico de EAF de A. satureioides sobre linfocitos de equinos y, analizar su composición química. Metodología: Partes aéreas del vegetal se extrajeron con agua a 4ºC por 2 días, se filtró y se liofilizó, obteniéndose EAF. Diferentes concentraciones (0-3000 µg/mL) de EAF se enfrentaron a cultivos de linfocitos de equinos por 18-24 h. Luego, se evaluó la citotoxicidad por: a) Tinción por exclusión al Azul Tripán (AT) y b) Reducción de MTT. Por otra parte, cultivos de linfocitos tratados con 50, 100, 250, 1500 y 3000 µg/mL de EAF por 18-24 h fueron sometidos a estudios de apoptosis, evaluándose por: a) Ensayo de TUNEL y b) Análisis de la Fragmentación de ADN por electroforesis en gel de agarosa. El análisis de la composición química se realizó por HPLC-ESI-MS/MS. Resultados y Discusión: El poder tóxico de EAF fue bajo, con relación dosis-respuesta. Los valores de CC50 fueron 1300 µg/mL (AT) y 700 µg/mL (MTT). Los resultados de TUNEL, indicaron ausencia de células apoptóticas en tratamientos 50 y 100 µg/mL y presencia en concentraciones más altas. Sin embargo, el análisis de fragmentación de ADN no mostró un patrón de fragmentación característico de apoptosis. TUNEL, quizás, podría estar detectando células pre-apoptóticas. El análisis químico indicó presencia de quercetina, 3-O-metilquercetina y luteolina. En conclusión, concentraciones menores a 100 µg/mL de EAF de A. satureioides son seguras ya que no generan daños en células de equinos.