Investigación de la actividad antiestafilocócica y citotóxica de extracto acuoso de Acacia aroma.

MATTANA CLAUDIA; SATORRES SARA; SOSA A.; SABINI MARÍA CAROLA; SABINI LILIANA INÉS; ALCARÁZ LUCIA

CAGLIARI

Congreso; “XIX° Congreso Italo-Latinoamericano de Etnomedicina “Fernando Cabieses Molina”; 2010

SOCIETÁ ITALO-LATINOAMERICANA DI ETNOMEDICINA

Investigación de la actividad antiestafilocócica y citotóxica de extracto acuoso de Acacia aroma. Mattana C(1), Satorres S, (1) Sosa A(2), Sabini C(3), Sabini L(3), Alcaráz L. (1) (1)Área Microbiología. (2)Área Farmacognosia. Fac. de Qca, Bioqca y Farmacia. UNSL. San Luis. Argentina. (3)Departamento de Microbiología e Inmunología, Fac. de Cs. Ex. Fco-Qcas y Nat. UNRC. Córdoba. Argentina. E-mail:cmmattan@unsl.edu.ar Ante la comprobada resistencia de Staphylococcus aureus a múltiples antibióticos, se han realizado numerosas investigaciones orientadas hacia la búsqueda de nuevos compuestos con actividades biológicas, siendo las plantas una fuente importante de productos naturales con actividad antibacteriana. En la medicina folclórica de Argentina, la especie Acacia aroma, comúnmente llamada “tusca”, es usada como cicatrizante y antiséptico para el tratamiento de heridas. El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad antiestafilocócica de extracto acuoso de A. aroma y su potencial citotoxicidad frente a células Vero. Ensayo microbiológico. Se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) del extracto (obtenido a 70ºC) frente a cepas de S. aureus ATCC 29213, S. aureus ATCC 43300, S. aureus ATCC 35556 y 6 aislamientos locales de S. aureus obtenidos de infecciones de piel. Se empleó el ensayo de microdilución en caldo utilizando microplacas de 96 pocillos. Se adicionó en cada pocillo 95 μl de caldo Moeller Hinton suplementado con 0,01% de cloruro de 2,3,5,-trifeniltetrazolium como indicador visual de crecimiento bacteriano, 5 µl de una suspensión de 107UFC/ml de las cepas y 100 μl de diluciones seriadas en base dos (2000 - 62,5 μg/ml) del extracto. Se incluyeron controles de medio, extracto y cepas. La experiencia se realizó por triplicado. Las placas se incubaron a 37ºC 24 h, se añadió 100 μl de isopropanol para disolver los cristales de formazán y se leyó la absorbancia a 655 nm en lector de Elisa. Ensayo de citotoxicidad. La citotoxicidad del extracto acuoso fue determinada por el método del rojo neutro utilizando monocapas de células Vero ATCC CCL-81 pasaje 95 sembradas en microplacas de 96 pocillos. Se probaron 11 concentraciones del extracto: 5000, 4000, 3000, 2000, 1000, 800, 600, 500, 300, 100 y 50 µg/ml. Se incluyeron 8 pocillos con medio de mantenimiento como control celular. Se adicionaron 200 µl de cada dilución de extracto por pocillo y se incubó 48 h a 37ºC. La experiencia se realizó por cuadruplicado. Posteriormente se descartó el medio con extracto, se agregó una solución de rojo neutro (30 µg/ml) y se incubó durante 3 h a 37ºC. Se descartó el medio con rojo neutro, se adicionó una solución de extracción: agua:alcohol:ácido acético (49:50:1) y se agitó la placa suavemente por 15 min. La absorbancia se leyó a 540 nm en lector de Elisa. Con los valores de densidades ópticas de ambos ensayos se calcularon los porcentajes de inhibición bacteriana, Concentración Efectiva 50 (CE50), Concentración Citotóxica 50 (CC50) e Índice de Selectividad (IS). Los resultados obtenidos indicaron una CIM en el rango de 250 a 500µg/ml, una CE50 de 190±10 µg/ml, una CC50 de 1,8 mg/ml y un IS=9,50±0,5. El índice de selectividad obtenido nos garantiza su selectividad de acción por lo que sería factible la aplicabilidad de este extracto como posible fitoterapéutico antiestafilocócico sobre tejidos vivos.