EVALUACION DE PARAMETROS CITOTOXICOS EJERCIDOS POR EXTRACTOS DE Verbascum thapsus SOBRE CÉLULAS VERO.

ESCOBAR FRANCO MATÍAS; GALLOTTI VALERIA; SABINI MARÍA CAROLA; TORRES CRISTINA VANESA; TONN CARLOS EUGENIO; GIORDANO OSCAR; SABINI LILIANA INÉS

TAFÍ DEL VALLE, TUCUMÁN

Congreso; “XXV Jornadas Científicas”.; 2008

ASOCIACIÓN DE BIOLOGÍA DE TUCUMÁN

EVALUACION DE PARAMETROS CITOTOXICOS EJERCIDOS POR EXTRACTOS DE Verbascum thapsus SOBRE CÉLULAS VERO. Escobar1 F., Gallotti1 V., Sabini2 C., Torres1 C., Tonn3 C.,Giordano3 O., Sabini1, L. 1: Dpto. Microbiología. FCEFQyN, UNRC, (5800) Río IV, Cba. 2: UNC, (5000) Córdoba; 3: UNSL, (5700) San Luis. lsabini@exa.unrc.edu.ar Introducción: Verbascum thapsus L. Scrophulariacea, también conocida como verbascum común o verbascum lanoso es una planta erecta bianual, nativa de Europa y Asia y fue introducida en América como hierba medicinal. Existen numerosos reportes de la utilización de esta planta en la medicina popular; posee propiedades emolientes, expectorantes, astringentes y es usada en la neumonía, para combatir la fiebre, congestión y alergias. Sin embargo, la aplicación de derivados de la planta in vivo exige estudios previos de inocuidad que garanticen su utilización sin riesgos. Objetivo: Evaluar sobre células Vero el efecto citotóxico de 5 extractos vegetales (EV) preparados a partir V. thapsus. Materiales y Métodos: Se obtuvieron, por agitación continua y secuencial, extractos orgánicos: n-hexánico (EH), clorofórmico (EC), metanólico (EM) y separadamente acuosos frío y caliente (EAF y EAC) de hojas de la planta. Para los ensayos de toxicidad, se obtuvieron diferentes concentraciones de cada EV en MEM-Eagle-Earle + 2% SFB, las que fueron sembradas por triplicado sobre monocapas preformadas de células Vero. El sistema se incubó durante 48 hs a 37°C e incluyó como control células sin EV. Al cabo de ese tiempo se cuantificaron: la Máxima Concentración No Citotóxica (MCNC) por visualización diaria al m. óptico, y las concentraciones citotóxicas 50% (CC50) por los métodos colorimétricos de captación de Rojo Neutro y reducción de MTT. Resultados: Se obtuvieron los rendimientos p/p y los parámetros de citotoxicidad para todos los EV (Tabla 1). Extractos ensayados EAF EAC EH EC EM Rendimiento (p/p) 0,325 0,328 1,51 14 10 MCNC (µg/ml) 3000 2500 >1000 429 850 CC50 % RN (µg/ml) 4152 3115 >1000 1100 584 CC50 % MTT (µg/ml) ND# 3592 >1000 1417 820 ND#: No Determinado Se observó una correlación entre los tres ensayos efectuados, pudiendo establecerse un orden de toxicidad para las fracciones vegetales: EAF <EAC <EH <EM <EC. Conclusiones: La determinación de la MCNC fue útil para ajustar rangos de concentraciones tóxicas por RN y MTT. Los ensayos de citotoxicidad por estos dos métodos evidenciaron ser altamente sensibles para detectar rápidamente la toxicidad de los extractos. Además, los valores de CC50 alcanzados por RN fueron menores que los logrados con MTT, por lo que se puede aseverar que las sustancias químicas presentes en las fracciones vegetales estarían ejerciendo un daño que comprometería la función lisosomal más que a la capacidad respiratoria mitocondrial de las células tratadas. La valoración de la toxicidad de Verbascum thapsus ayudara a definir su selectividad de acción en aplicaciones terapéuticas futuras de sus extractos sobre células eucariota.