Evidencias de conexión entre las vías Wnt/beta-catenina y TGF/Smads en Hepatocarcinoma Celular (HCC)

CEBALLOS M P; PARODY J P; ALVAREZ M L; INGARAMO P; CARNOVALE C E; CARRILLO M C

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2011

La vía Wnt/betacatenina está frecuentemente activada en HCC e involucra la acumulación de betacatenina y su migración al núcleo, donde promueve la proliferación uniéndose al factor TCF4. El Interferón alfa (IFN) posee potencial terapéutico para prevenir y tratar el HCC. El TGFbeta (TGF) es un mediador de apoptosis y actúa a través de las proteínas Smads. Una forma de interacción entre las vías Wnt/betacatenina y TGF/Smads es por asociación de Smads con el complejo betacatenina/TCF4. Demostramos anteriormente que IFN y TGF reducen los niveles nucleares de betacatenina y su unión a TCF4, disminuyen proliferación y aumentan apoptosis, en HepG2 y Huh7. Decidimos evaluar los efectos de IFN y TGF (48hs) en HepG2 y Huh7, sobre los niveles proteicos del receptor de la vía Wnt/betacatenina (Frizzled7) y de Smads (inmunoblot), y sobre la asociación Smads/TCF4(co-inmunoprecipitación). Analizamos también los niveles proteicos de betacatenina y Smads (inmunoblot), luego de tratar las células con Wnt3a (48hs). IFN y TGF disminuyeron Frizzled7 en lisado (HepG2: IFN -66%* TGF -69%* Huh7: IFN -64%* TGF -83%*), Smads en núcleo (HepG2: Smad2p: IFN -68%* TGF -85%* Smad3p: IFN -72%* TGF -79%* Smad4: IFN -66%* TGF -81%* Smad7: IFN -65%* TGF -69%*. Similar en Huh7) y la unión Smads/TCF4 en lisado. Wnt3a aumentó en núcleo los niveles de betacatenina (HepG2: +420%* Huh7: +880%*) y Smads (HepG2: Smad2p: +400%* Smad3p: +350%* Smad4: +110%* Smad7: +290%* Huh7: Smad2p: +1000%* Smad3p: +800%* Smad4: +170%* Smad7: +650%*).*p<0,05. Estos resultados, junto con los anteriores, indican que IFN y TGF no solo atenúan la vía Wnt/betacatenina, sino que también reducen los niveles de Smads y su asociación a TCF4 en líneas de HCC. La activación de Wnt/betacatenina con Wnt3a aumenta Smads, indicando que el nivel de estas proteínas está modulado por el estado de dicha vía. La inhibición de la formación de complejos betacatenina/TCF4/Smads podría desacelerar la oncogénesis, ya que las citoquinas disminuyen proliferación y aumentan apoptosis.