La inhibición de la actividad de la esfingomielina sintasa 1 induce una transición epitelio-mesénquima (TEM)

BRANDAN YAMILA; GUAYTIMA EDITH; STERIN-SPEZIALE NORMA B; MARQUEZ MG

La Rioja

Jornada; II JORNADAS DE DIVULGACIÓN CIENTÍFICA Y ACADÉMICA, UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA RIOJA; 2017

Universidad Nacional de La Rioja

Durante la TEM, contrariamente a lo que ocurre en la transición mesénquima-epitelio (TME), las células pierden su fenotipo epitelial y adquieren características de células mesenquimáticas. La TEM ocurre normalmente durante el desarrollo embrionario, y en el los tejidos adultos se activa durante la inflamación, cicatrización de heridas y regeneración de tejidos, e incluso se la ha relacionado con el desarrollo de enfermedades como fibrosis y cáncer. La enzima esfingomielina sintasa 1 (SMS 1) participa en la última etapa de síntesis de esfingomielina. En trabajos previos hemos demostrado que la inhibición de su actividad produce una pérdida de las uniones entre las células del túbulo colector (TC) y de la morfología epitelial. Teniendo en cuenta que estas características son coincidentes con lo que ocurren durante la TEM, se propuso investigar si la inhibición de la actividad de la SMS 1 induce este proceso. Para ello, se realizaron cultivos primarios de células de TC de papila renal de ratas adultas, y a las 72 h de cultivo cuando las células estaban totalmente asociadas, se agregó el inhibidor de la enzima (D609), y se incubó durante 24 h adicionales. Mediante inmunocitoquímica e inmunoblot se analizó la expresión de los marcadores de células mesenquimáticas vimentina y α-actina de músculo liso (α-SMA). Los resultados demuestran que en condiciones basales, las células forman monocapas, presentan una baja expresión de vimentina, y casi nula de α-SMA. También se observan escasas células superpuestas que no forman parte de la monocapa, con una morfología de tipo fibroblastoide, y fuerte expresión de ambos marcadores. Luego del tratamiento con D609, se observa un mayor número de células superpuestas, y de células de la monocapa que expresan vimentina y α-SMA. El análisis del nivel de ambas proteínas mediante inmunoblot, mostró una correlación con el aumento en el número de células que expresan vimentina y α-SMA luego del tratamiento con el inhibidor. Teniendo en cuenta los cambios observados en la morfología de las células, y la síntesis de novo de α-SMA, sugerimos que la inhibición de la actividad SMS 1 provocaría una alteración en el equilibrio entre los procesos TEM-TME, generando miofibroblastos a partir de las células de TC preexistentes, debido a la dificultad para formar uniones adherentes. En este contexto, además de proponer por primera vez que la síntesis de esfingomielina es una herramienta importante para mantener el equilibrio entre TEM-TME, también proponemos a SMS 1 como un modulador de este proceso.