Mecanismos celulares que median la formación del túbulo colector durante el desarrollo renal posnatal

GUAYTIMA EDITH; BRANDAN YAMILA; VALLS JERONIMO; STERIN SPEZIALE NORMA; MARQUEZ MG

La Rioja

Jornada; II JORNADAS DE DIVULGACION CIENTIFICA Y ACADEMICA, UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA RIOJA; 2017

Universidad Nacional de La Rioja

Durante la nefrogénesis ocurre una mutua inducción entre las células del brote ureteral (BU) y las del mesénquima metanéfrico (MM), para dar origen a los túbulos colectores (TC), y a las nefronas, respectivamente. En la rata, a diferencia del humano, el desarrollo renal se completa luego del nacimiento. En el presente trabajo, utilizando como modelo experimental el cultivo primario de células de TC de rata neonata, se investigaron los mecanismos que participan en la formación posnatal del TC. La adquisición o pérdida secuencial de glicoconjugados puede considerarse un marcador del estado de diferenciación durante el desarrollo. La lectina Dolichos Biflorus Agglutinin (DBA) se une a glicoconjugados presentes en células del BU y TC, y la Griffonia Simplicifolia Lectin-I (BSL), a los presentes en células intersticiales. Con el fin de evaluar el grado de diferenciación de las células de TC en el cultivo primario, se analizó mediante inmunocitoquímica la capacidad de las células de unir DBA y BSL, junto con la expresión de biomarcadores de células epiteliales (citoqueratina-7, CK7, y proteínas de las uniones adherentes), y mesenquimáticas (vimentina y α-actina de músculo liso, α-SMA). Se observó que en una misma colonia coexisten células que difieren en el grado de diferenciación. Las de mayor grado exhiben señal positiva para DBA, uniones adherentes, y filamentos intermedios formados por CK7. Las de menor grado expresan vimentina, CK7 citosólica, positividad para ambas lectinas, solo BSL, o ninguna, y carecen de uniones adherentes maduras. El análisis fenotípico de las células aisladas ubicadas en el borde de las colonias demostró que son células mesenquimáticas; y las reconstrucciones 3D y perfiles xz de imágenes de microscopia confocal, demostraron que se localizan adyacente o por debajo de la colonia. El estudio del comportamiento de las células en tiempo real mediante microscopía de contraste de fase reveló que pueden insertarse entre las células de la colonia desde el plano basal mediante una transición mesénquima-epitelio (TME), que implica pérdida del fenotipo mesenquimático y adquisición de fenotipo epitelial. Asimismo, estas células parecen originarse in situ mediante una transición epitelio-mesénquima (TEM) a partir de las células epiteliales de las colonias. Por lo tanto, los resultados sugieren la existencia de un ?equilibrio dinámico? entre las células del TC y las mesenquimáticas, fuertemente desplazado hacia las primeras. Muy probablemente, entre las células de TC del borde de la colonia y las mesenquimáticas generadas de novo ocurre la mutua inducción antes descripta.