La inhibición de la esfingomielina sintasa 1 induce el retorno a las etapas iniciales de la formación de los tejidos en células renales

BRANDAN YAMILA; GUAYTIMA EDITH; FRANCO EXEQUIEL MEGIAS; VALLS JERONIMO; STERIN-SPEZIALE NORMA B; MARQUEZ M GABRIELA

La Rioja

Jornada; JORNADAS DE CIENCIA, TECNOLOGIA Y ARTE CIENTIFICO DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA RIOJA 2016; 2016

UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA RIOJA

Previamente hemos demostrado que las uniones adherentes (UA) y los contactos focales (CF) se localizan en dominios raft enriquecidos en colesterol y esfingomielina (SM), y que la inhibición de la esfingomielina sintasa 1 (SMS1), localizada en el Aparato de Golgi, altera a las uniones célula-célula. Ahora decidimos investigar la reversibilidad de la inhibición farmacológica de la enzima en las UA, y estudiar el efecto que se produce sobre los CF y el citoesqueleto de actina. Para cumplir con estos objetivos realizamos cultivos primarios de células del túbulo colector de la papila renal de ratas adultas y a las 72 h de cultivo agregamos el inhibidor farmacológico de la SMS1, llamado D609 e incubamos por 24 h adicionales. Observamos que al agregar concentraciones crecientes del inhibidor se alteró la morfología epitelial típica de las células, acompañado con cambios en el córtex de actina y una remodelación en las fibras de estrés. Además se observó un incremento en el número de CF que contienen vinculina. Aunque el inhibidor induce la alteración de las adhesiones intercelulares, el análisis de las proteínas que constituyen estos complejos mediante Western Blot no demostró una disminución en la cantidad de las mismas. Estos resultados sugieren que la alteración en las UA podría deberse a la falta de trasporte vesicular de las proteínas a los sitios de armado en la membrana plasmática. Adicionalmente, el efecto del D609 sobre las UA parece ser reversible debido a que las células volvieron a formar uniones intercelulares en ausencia del inhibidor. En conjunto, los resultados sugieren que la inhibición de la SMS1 provocaría un retorno a las etapas iniciales del desarrollo de los tejidos, que es la formación de CF con el objeto de mantener a las células adheridas a la matriz extracelular y de esta forma asegurar su supervivencia.