La alteración de la membrana plasmática induce la formación de vesículas que no forman parte del compartimiento de reciclaje

BRANDAN YAMILA; GUAYTIMA EDITH; MARIA BELEN DE LA VEGA; STERIN-SPEZIALE N; MARQUEZ M GABRIELA

La Rioja

Jornada; JORNADAS CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA RIOJA 2014; 2014

UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA RIOJA

La vinculina forma parte de los contactos focales (CF), que son estructuras que unen la célula a la matriz extracelular. En trabajos previos utilizando células de túbulo colector de papila renal demostramos que la hormona intrarenal bradiquinina (BK) ejerce un efecto modulador sobre los CF, movilizando vinculina por un mecanismo que involucra la hidrólisis de fosfatidilinositol-4,5-difosfato (PIP2). A tiempos prolongados de estimulación con BK los CF conteniendo vinculina vuelven a formarse, definiendo la reversibilidad de su efecto. Este proceso ocurre con la aparición simultánea en el citosol de vesículas conteniendo vinculina, PIP2 y marcadores del compartimiento de reciclaje endosomal, como Rab 5, Rab 11 y el receptor de transferrina. Nuestro objetivo fue investigar si la formación de estas vesículas constituye un fenómeno general o específico de BK. Para tal fin, tratamos cultivos primarios de células de túbulo colector de papila renal con ciclodextrina (CD) y neomicina, agentes que alteran la composición lipídica de la membrana. Este tratamiento provocó la disipación de los CF, y la formación de estructuras vesiculares conteniendo vinculina en el citosol. Luego tratamos cortes de papila renal con los mismos agentes y aislamos dichas vesículas por métodos inmunomagnéticos. El análisis de las vesículas por Western blot mostró la ausencia de marcadores del compartimiento de reciclaje. Concluimos que la vía endocítica de reciclaje de la vinculina no es un fenómeno general. Podría representar un mecanismo fisiológico por medio del cual la célula reutiliza la vinculina internalizada para ensamblar nuevos CF, hecho que ocurre luego de tiempos largos de estimulación con BK pero no luego del tratamiento con CD y neomicina debido a su efecto deletéreo sobre los microdominios rafts donde se localizan los CF