Caracterización de metabolitos antifúngicos producidos por Bacillus atrophaeus

GARAY L; H.A. GARRO; VILLEGAS L; DELFINI C

Congreso; IV Reunión Conjunta de las Sociedades de Biología de la República Argentina; 2020

El control biológico es un método que emplea tantos organismos vivos como sus metabolitos para reducir la densidad poblacional de otros organismos plaga, contribuyendo de esta manera, la disminución del uso de pesticidas químicos. El cepario de Microbiología ambiental del INQUISAL cuenta con una bacteria del género Bacillus aislada de guano de murciélago, la cual mostró en trabajos preliminares anteriores, actividad quitinolítica y capacidad de inhibir hongos fitopatógenos.El objetivo de este trabajo fue caracterizar la naturaleza de aquellos metabolitos involucrados en la actividad antifúngica presentes en el sobrenadante libres de células (SLC) de Bacillus atrophaeus A14 que manifestaron actividad antimicrobiana.Se cultivó la cepa de B. atrophaeus A 14 en Standar Nutrient (SN) durante 48 h. Se obtuvo el SLC por centrifugación a 4 °C durante 15 min a 10.000xg. Para la caracterización de los metabolitos de interés se realizaron diferentes ensayos: i) extracción con n-butanol saturado en agua; obteniendo dos fracciones: una butanólica y una fracción acuosa; ii) precipitación ácida, obteniéndose dos fracciones: una soluble en ácido y otra insoluble en ácido, con posterior disolución en metanol; iii) precipitación con etanol y posterior disolución en agua. A cada una de las fracciones se le determinó la actividad antifúngica por difusión en agar sobre placas de Petri que contenían el agar-papa-glucosado usando como hongo reportero de la actividad antifúngica a Colletotrichum acutatum.La actividad se encontró principalmente en la fracción butanólica y en el precipitado ácido disuelto en metanol. Posteriormente a las fracciones que presentaron actividad antifúngica se les realizó la técnica de bioautografía sobre placas de sílica y se las analizó por medio de ¹H-RMN, ¹³C-RMN.A partir de los resultados de este trabajo se concluye que los metabolitos con actividad antifúngica de SLC de B. atrophaeus A14 pertenecerían a la familia de los lipopéptidos debido a su solubilidad en butanol y metanol, e insolubilidad con HCl. Los resultados obtenidos por ¹H-RMN y ¹³C-RMN y bioautografia concuerdan con los informados en la bibliografía para Fengicina. Fengicina es un lipopédtido cíclico que puede adoptar y mimetizar estructuras secundarias (de tipo loops e incluso vesiculares) con naturaleza surfactante, confiriéndole actividades antimicrobianas bastante selectivas [1].Se proyecta profundizar en el futuro estos estudios y aplicarlos al control de las enfermedades provocadas por hongos en el contexto de una estrategia de manejo integrado de plagas.