INCREMENTO DE LA ACTIVIDAD LACASA EN TRAMETES VERSICOLOR UTILIZANDO VERDE DE MALAQUITA COMO INDUCTOR

FRANCISCO KUHAR;; VALERIA CASTIGLIA;; LEANDRO PAPINUTTI;

Palais Rouge, Jerónimo Salguero 1443/49 CABA

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología; 2010

Asociación Argentina de Microbiología

La característica que define al grupo fisiológico de hongos causantes de pudrición blanca es su capacidad de degradar la lignina. Esta es el polímero aromático más abundante de la naturaleza y sus unidades son moléculas fenilpropanoides que se polimerizan al azar dando una estructura amorfa muy recalcitrante a la degradación. Estos hongos tienen un sistema de enzimas oxidoreductasas ligninolíticas que, al ser inespecíficas, tienen actividad catalítica sobre muchos compuestos artificiales aromáticos. Un gran número de estos compuestos son utilizados por la industria y luego volcados a través de efluentes como residuos, ocasionando un grave problema de contaminación ambiental. Por ello estos hongos representan en la actualidad uno de los recursos naturales más promisorios en la biorremediación de suelos y aguas. Se ha comprobado que algunos compuestos aromáticos pueden ser potentes inductores de actividades ligninolíticas, por lo tanto estudiar el efecto de compuestos aromáticos contaminantes en la producción de estas enzimas aumenta aún más las potencialidades de aplicación de estos organismos para el desarrollo de tecnología de protección ambiental. Se planteó como objetivo estudiar el efecto en las actividades ligninolíticas del agregado de cobre y del fungicida Verde de Malaquita (VM). Los experimentos se realizaron en cultivos estáticos de 11 días de T. versicolor cultivados en medio líquido definido a base de asparagina y glucosa como fuentes de nitrógeno y carbono respectivamente. El VM se agregó a estos cultivos en diferentes concentraciones y se tomaron muestras periódicamente a las que se les midieron las actividades ligninolíticas lacasa, manganeso peroxidasa y además la decoloración del VM. Se encontró que el VM 80 µM es un potente inductor de la actividad lacasa, que se incrementó hasta 16 veces respecto del control sin VM, registrándose este pico a las 120 h luego de agregado el VM. Con valores más altos en la concentración de VM la inducción fue menor. Se estudió también el efecto del cobre, un conocido inductor de actividad lacasa, agregado al cultivo junto con el VM. Tras analizar los resultados se comprobó que todas las combinaciones en las concentraciones de cobre y VM resultaron en incrementos significativos de la actividad lacasa. Además las concentraciones más altas de VM (80 y 160 µM) produjeron aumentos mayores que los detectados en los cultivos sin cobre. Los cultivos a los que se agregó sólo cobre también registraron aumentos de hasta 15 veces respecto de aquellos sin ningún agregado. Dado que se comprobó que ambos compuestos (VM y cobre) son potentes inductores de actividad lacasa, el siguiente paso consistió en estudiar los patrones isoenzimáticos de esta enzima para comprobar si existía algún tipo de inducción diferencial respecto del compuesto inductor utilizado. El revelado de los geles mostró idéntico patrón de isoenzimas de lacasa para todos los tratamientos aplicados. El VM es un eficiente inductor de la actividad lacasa y puede reemplazar al cobre, que presenta problemas adicionales de contaminación al tratarse de un metal pesado. El VM, no sólo aumenta la actividad lacasa sino que además es degradado por esta misma, resultando su agregado inocuo para el medioambiente.