Mecanismo de acción de progesterona en células endoteliales: cross-talk entre efectos rápidos y genómicos

CUTINI P.; MASSHEIMER V.

Congreso; LIII REUNION CIENTIFICA ANUAL-Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC). REUNION CIENTIFICA-Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2008

En la última década se ha propuesto que el mecanismo de acción de las hormonas esteroides comprendería acciones no genómicas de activación de sistemas de señalización intracelular que contribuirían a la regulación de la transcripción génica. En este trabajo investigamos la existencia de una interacción entre los efectos genómicos y no genómicos de progesterona (Pg) en células endoteliales (CE). Se emplearon CE, obtenidas por cultivo primario de explantes de anillos de aorta de ratas Wistar, tratadas con concentraciones fisiológicas de Pg. Como efecto no genómico se evalúo la acción de Pg sobre la síntesis de óxido nítrico (NO) por el método de Griess. Se demostró que 20 min de tratamientos con Pg (1, 10 y 100 nM) estimuló la síntesis de NO (42%, 29% y 103% s/control, p menor a 0.02). La rapidez de la respuesta sugiere la independencia de la transcripción génica. La preincubación con inhibidores de la transcripción y de síntesis proteica (actinomicina, 10 μg/ml, cicloheximida, 100 μM) no alteró la acción hormonal, confirmando la naturaleza no genómica del efecto. Como parámetro genómico seleccionamos la proliferación celular (incorporación de [3H]-timidina). Se observó una inhibición de la proliferación de CE luego de 24 h de tratamiento con 10 nM Pg (207±45 vs 110±25, C vs Pg, p menor a 0.02). El efecto antiproliferativo fue suprimido completamente por cicloheximida y actinomicina. Obtuvimos evidencia de que la síntesis de ADN dependiente de Pg comprende la vía NOS, al bloquear completamente la acción del esteroide por el inhibidor de NOS (L-NAME, 10 μM). Considerando que previamente hemos descripto que Pg estimula en forma no genómica la actividad MAPK, estudiamos el rol de esta vía sobre la regulación de la proliferación. El pretratamiento con PD98059 (inhibidor MAPK) suprimió el efecto del esteroide (185.0±18.5 vs 86.9±11.3; 180.8±19.2 vs 198.8±28.4 cpmx103/mg prot, C vs 10nM Pg -/+ PD98059, p menor a 0.001). Concluimos que a nivel del endotelio vascular Pg actúa a través de un mecanismo de acción de dos pasos que vincula acciones genómicas y no genómicas.