Evaluating possible sources of bias when administering the olfactory habituation-dishabituation test in mice

TOPSAKALIAN, DIEGO MARTÍN; FOTTI, JAVIER H; RELA, LORENA; GARIBOTTI, GILDA

Virtual

Congreso; XIV CLATSE; 2021

Sociedad Uruguaya de Estadística

En modelos de da~no reversible al nervio olfatorio, la integridad funcional reeja la recuperacion delda~no y puede evaluarse con la prueba de habituacion-deshabituacion a olores. La exposicion repetida aun estmulo reduce progresivamente la actividad de olfateo (habituacion), mientras que se incrementa eltiempo de olfateo ante un odorante novedoso (deshabituacion). La conducta se parametriza utilizandondices de deshabituacion (ID, Figuras 1A-B). El tiempo de olfateo se cuantica manualmente a partirde videos. Los observadores son ciegos a los tratamientos, pero la evaluacion es susceptible de sesgos,como aquellos por expectativa y por deriva. El sesgo por expectativa se da si una hipotesis inuenciala cuanticacion. Para evaluarlo, reclutamos 12 voluntarios, que cuanticaron la conducta olfativa deratones normosmicos y anosmicos. Los videos de la conducta se fragmentaron en cada presentacion deestmulo y recompilaron secuencial o aleatorizadamente (con presentaciones de diferentes estmulos, tratamientosy/o animales). Mediante ANOVA (modelos mixtos), no detectamos efecto signicativo de laaleatorizacion (p = 0,9095), ni interaccion signicativa con tratamiento (p = 0,3057), con estmulo (p= 0,5969), o con ambos (p = 0,0783) (Figura 1C). As, en nuestras condiciones, aleatorizar no ofreceventaja. La deriva del observador se reere al cambio en los criterios de analisis con el tiempo. Para suevaluacion, comparamos datos obtenidos por observadores que analizaron videos de ratones normosmicos,compilados secuencialmente. No observamos diferencias signicativas entre dos modelos que diferan enla inclusion del observador como variable aleatoria (p = 0,9999). Inferimos que entre el entrenamientode los observadores y la nalizacion del analisis de la conducta no se produjo deriva que afecte la reproducibilidadinterindividual (Figura 1D). Finalmente, para reducir la variabilidad, evaluamos el efecto deasistir visualmente al observador mediante una region de interes (RdI) dentro de la que el olfateo debeser cuanticado (Figura 1A). Se comparo la cuanticacion de la conducta de ratones normosmicos en unaserie de presentaciones (n = 8) observadas con la RdI delimitada o sin ella, cada una por duplicado yen orden aleatorio. La RdI no afecto signicativamente al tiempo de exploracion promedio (p = 0,6552)ni se observo interaccion entre presencia de RdI y estmulo (p = 0,7607). En cambio, se vio un efectosignicativo de la presencia de RdI en la reproducibilidad intraindividual (p = 0,0193). Los resultadospermiten recomendar que la cuanticacion se haga por observacion secuencial de la conducta y con RdIgua. Ademas, las cuanticaciones de diferentes observadores pueden interpretarse conjuntamente.