Caracterización de EgAT1: un transportador de glutamato en Echinococcus granulosus.

CAMICIA, F.; CÁNEPA, G.; PRADA, L.; PEREIRA, C.A.; ROSENZVIT, M.C.

Fondo Cultural Universitario de la Universidad Nacional del Litoral, Santa Fe

Congreso; XXIII Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2009

Sociedad Argentina de Protozoología

La hidatidosis, causada por el parásito cestode Echinococcus granulosus (Eg), es una zoonosis que afecta a la salud pública y la economía a nivel mundial. La hidatidosis constituye una seria amenaza para la salud humana y la cirugía constituye la principal forma de tratamiento. Mediante la técnica de captura de secuencia señal (Signal Sequence Trap) y el análisis bioinformático del genoma de Echinococcus sp, hemos detectado la existencia de varias secuencias codificantes para transportadores de aminoácidos. La secuencia más caracterizada es la de un ADN copia de 1627 pares de bases, denominado egat1, que contiene un marco de lectura abierto de 489 aminoácidos y muestra una identidad aminoacídica del 30% con transportadores de aminoácidos neutros y excitatorios pertenecientes a la familia de simportadores de dicarboxilatos/aminoácidos y cationes (DAACS, TC Nº 2.A.23). Análisis adicionales de EgAT1 muestran la presencia de entre 9 y 10 dominios transmembrana, secuencias consenso de N-glicosilación y un perfil hidropático altamente similar con miembros de la familia DAACS. En protoescólices, la hibridación in situ muestra que el ARNm de egat1 se localizaría a lo largo del tegumento. La proteína EgAT1, que en ensayos de Western blot mostró una masa molecular de 60 kD, se localizó en la región subtegumentaria del metacestode, particularmente alrededor de las ventosas y el rostello de los protoescólices y membrana germinal de las cápsulas prolígeras. La transfección de células COS7 con un plásmido recombinante codificante para EgAT1 resultó en la expresión de una proteína de 75 kDa en las membranas del sistema endomembranoso interno. Los ensayos funcionales, realizados en células COS7 transfectadas e incubadas con aminoácidos radioactivos mostraron que EgAT1 transporta glutamato pero no aspartato. Esta especificidad de transporte no ha sido reportada para otros transportadores de glutamato pertenecientes a esta familia. Los resultados obtenidos muestran que EgAT1 sería el primer transportador de la familia DAACS caracterizado en platihelmintos. La caracterización de egat1 pone de manifiesto la importancia de los transportadores de aminoácidos en la biología delos platihelmintos y abre el camino hacia la caracterización de nuevos transportadores de aminoácidos, posibilitando una búsqueda más racional de drogas y nuevas opciones de tratamiento contra la hidatidosis.