Efectos del lipopolisacárido bacteriano (LPS) sobre la actividad y los niveles de expresión de la ciclooxigenasa-2 y la producción de esteroides en células adrenales Y1: posible rol de NFkB

MARTINEZ CALEJMAN C; ARIAS P.; DI GRUCCIO J.M.; REPETTO E.M.; CIPELLI J.M.; MERCAU M.; ARIAS P.; PIGNATARO O.P.; CYMERYNG C. B.

Mar del Plata, Pcia. Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

El aumento en los niveles de glucocorticoides durante el proceso inflamatorio experimental inducido por LPS ha sido atribuido principalmente a sus acciones sobre niveles superiores del eje hipotálamo-hipófiso-adrenal. Sin embargo, existen evidencias de efectos directos ejercidos por el LPS sobre células adrenales. Objetivos: Analizar el efecto del LPS sobre la producción de esteroides en células adrenales Y1 y estudiar el mecanismo de recepción/transducción de señales involucrado. Resultados: Esta línea celular murina expresa receptores Toll-like 4 (TL4) (RT-PCR). Células Y1 transfectadas con un plásmido reportero de luciferasa con un elemento de reconocimiento de NFkappaB mostraron, tras la estimulación con LPS (10 µg/ml), un aumento en la actividad de dicha enzima (Control: 0,88 ± 0,10; LPS: 2,00 ± 0,09; p < 0,0001; media ± SD; test Wilcoxon). Este tratamiento indujo además un aumento en la producción de progesterona; dicho efecto fue reducido por la co-incubación con un inhibidor de la actividad de IKK (IKK-Inh) (Control: 46,3 ± 2,3;  LPS: 93,0 ± 7,4;  IKK-Inh: 46,9 ± 2,7; LPS + IKK-Inh: 67,0 ± 4,0 ng/ml;  Control vs LPS p< 0.001;  LPS vs LPS + IKK-Inh, p < 0,01; ANOVA). La expresión de ciclooxigenasa 2 aumentó (COX-2; western blot) tras el tratamiento con LPS.  El aumento en los niveles de progesterona inducido por LPS fue inhibido significativamente por indometacina y diclofenac (inhibidores no selectivos) y por parecoxib (inhibidor selectivo de COX-2). Conclusión: Los resultados indican que el LPS estimula directamente la producción de esteroides por las células adrenales Y1. El receptor de membrana TL4 está presente en dichas células y la incubación de las mismas con LPS resulta en la activación de la vía de NFkappaB, y la inducción de genes específicos. Entre éstos, demostramos un aumento en los niveles de expresión de COX-2. Por último, la actividad de esta enzima parece ser relevante para el incremento de la esteroidogénesis inducido en estas células por LPS.