La interacción de Bordetella parapertussiscon rafts lipídicos mediada por el antígeno O modula la actividad bactericida del neutrófilo

GORGOJO, JUAN PABLO; ALVAREZ HAYES, JIMENA; RODRIGUEZ, MARÍA EUGENIA

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica ? LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2012

Bordetella parapertussis (Bpp) es uno de los agentes causales de la tos convulsa, una enfermedad reemergente. La presencia del antígeno O (AgO) en su superficie, bloquea el reconocimiento de los anticuerpos inducidos por las vacunas actuales. Resultados de nuestro grupo demuestran que en ausencia de opsoninas Bpp inhibe la fusión fagolisosomal y sobrevive a la interacción con neutrófilos (PMN) mediante un mecanismo dependiente del AgO. El objetivo de este trabajo es avanzar en la comprensión de las bases de este tráfico no bactericida. Empleando neutrófilos primarios humanos y técnicas de luminometría para la determinación de la inducción del estallido respiratorio se pudo comprobar que la interacción de Bpp con PMN no induce su activación y que el AgO está involucrado en este proceso. A diferencia de la cepa salvaje, un mutante defectivo en la expresión del AgO produjo la activación del PMN. En otros patógenos se ha observado que tanto la inhibición del tráfico a lisosomas como la activación de la célula inmune dependen de la unión de la bacteria a rafts lipidicos en la célula blanco a través del AgO. Utilizando bacterias GFP y sondas fluorescentes se determinaron los niveles de fagocitosis en presencia o ausencia de agentes disruptores de rafts lipidicos (metilβciclodextrina, MβCD), o que unen colesterol e interfieren en esta interacción (nistatina). La viabilidad intracelular bacteriana se evaluó utilizando ensayos de protección con polimixina B. Los resultados mostraron que la incubación de PMN con MβCD o nistatina reduce drásticamente el nivel de fagocitosis de Bpp y aumenta significativamente la actividad celular bactericida contra esta cepa. Por el contrario no se observaron diferencias en el nivel de fagocitosis o muerte de la cepa Bpp defectiva en AgO en PMN tratado o sin tratar. Estos resultados sugieren que el destino intracelular de Bpp está determinado por la presencia del antígeno O y su interacción con los rafts lipidicos en la célula inmune