CARACTERIZACIÓN DE UN PROBABLE TRANSPORTADOR DE HIERRO DE BORDETELLA PERTUSSIS COMO COMPONENTE DE LA VACUNA ACELULAR

ALVAREZ HAYES, JIMENA; GORGOJO, JUAN PABLO; RODRIGUEZ, MARÍA EUGENIA

San Miguel de Tucuman

Congreso; LIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2011

Bordetella pertussis (Bp) es el agente causal de la tos convulsa, enfermedad que ha tenido un importante aumento en la incidencia. La falta de protección de las vacunas acelulares (Pa) actualmente en uso, formuladas con proteínas cuya expresión en el fenotipo infectante está en discusión, parece ser una de las causas de esta situación. Proteínas inmunogénicas cuya expresión se induce en condiciones fisiológicas son potenciales candidatos vacunales. Usando proteómica comparativa nuestro grupo identificó proteínas de captura de hierro de alta afinidad expresadas por Bp durante la infección. Entre ellas AfuA (BP1605), una proteína que presenta alta homología con un transportador de hierro vital para otros patógenos durante la infección. Por inmunoproteómica observamos que AfuA es reconocida por sueros de individuos infectados lo que sugiere que es antigénica in vivo. En este estudio, se clonó, expresó, purifico, y evaluó su antigenicidad y capacidad protectora en animales. Encontramos que los anticuerpos producidos contra la proteína recombinante, reconocen la proteína nativa en ensayos de ELISA realizados con bacteria viva (título > 3000), indicando una posible ubicación de la proteína en la superficie bacteriana. Ensayos de fagocitosis empleando citometría de flujo no solo confirmaron su exposición en membrana externa, sino que además demostraron que los anticuerpos inducidos por rAfuA son capaces de promover la fagocitosis bacteriana por PMN, crítica para la limitación de la infección. En ensayos de protección activa en ratones observamos que el agregado de rAfuA a Pa aumentó significativamente el nivel de protección de Pa (p