Efecto protector de una mezcla microbiana constituida por bacterias de ácido láctico y levaduras aisladas de Kefir sobre la infección por Clostridium difficile en un modelo de hámster

BOLLA, P. A.; CARASI, PAULA; BOLLA, MARIA DE LOS ANGELES; DE ANTONI G.L; SERRADELL, MARÍA DE LOS ANGELES

Congreso; CONGRESO LATINOAMERICANO DE MICROBIOLOGIA; 2012

Clostridium difficile es un bacilo Gram positivo, anaerobio y formador de esporas, causante de cuadros gastrointestinales asociados con tratamiento antibiótico que van desde una diarrea leve a colitis pseudomembranosa. Los principales factores de virulencia de C. difficile son las toxinas A y B. Si bien existen evidencias de efectos protectores contra C. difficile por diferentes microorganismos probióticos, los resultados obtenidos en los ensayos clínicos aún no son concluyentes. En este trabajo se propone estudiar el efecto protector de una mezcla microbiana constituida por bacterias y levaduras aisladas de Kefir, sobre la infección de C. difficile 117 en un modelo in vivo. Para ello, los animales (hámster) se dividieron en 5 lotes con 7 animales, correspondiendo a: control placebo (C); placebo + antibiótico(CA); placebo + antibiótico + C. difficile117 (CI); mezcla microbiana (MM) + antibiótico (MMA); MM + antibiótico + C. difficile117 (MMI). Los animales recibieron MM o placebo en el agua de bebida desde el inicio de ensayo (día 0), se les administró 0,1ml de Clindamicina 2mg/ml (día 7), y fueron infectados el día 11 con 0,1ml C. difficile 1x108bacteria/animal por vía intragástrica. Se observó la evolución de los animales, peso, desarrollo de diarrea y supervivencia. Los animales fueron sacrificados al día 16 y durante la necropsia se extirpó una porción de ciego para tinción histológica y se reservó contenido para determinar la actividad biológica sobre células Vero. En el grupo de animales infectados (CI) el 85% desarrolló diarrea y el 75% murió, presentando además actividad citótoxica elevada. Los animales del lote MMI no presentaron diarrea ni murieron a lo largo del tratamiento. Un resultado similar se obtuvo para los animales del lote MMA, aunque en el lote que solo recibió antibiótico (CA) un 75% desarrolló diarrea y el 25% murió al final del ensayo. Los cortes histológicos de los animales del lote CI mostraron un marcado engrosamiento de la mucosa a expensas de edema e infiltrado inflamatorio con predominio de polimorfonucleares neutrófilos y formación de abscesos crípticos, estas características histológicas son compatibles con colitis aguda. Los animales tratados con MM mostraron un ligero engrosamiento de la mucosa por presencia de infiltrado inflamatorio linfocitario. En conclusión, la MM es capaz de prevenir la diarrea y enterocolitis provocada tanto por la infección de C. diffiicile como por el tratamiento antibiótico en un modelo in vivo.