La SUMOilación de AKT es requerida para la inducción del promotor de Nanog en células madre embrionarias

MARCOS FRANCIA; SOLEDAD COSENTINO; CAMILA VAZQUEZ ECHEGARAY; CLAUDIA SOLARI; AYELEN TORO; VICTORIA PETRONE; ARIEL WAISMAN; LINO BARAÑAO; ALEJANDRA GUBERMAN

Chascomús

Taller; IV Taller de Biología Celular y del Desarrollo; 2018

Lascélulasmadreembrionarias(CME)soncélulasderivadasdelmacizocelularinternodeblastocistos.Tienenlacapacidaddeauto-renovarseindefinidamenteydediferenciarsea=poscelularesdelastrescapas germinales. Este estado pluripotente es mantenido en parte por el Factor Inhibidor de laLeucemia(LIF)incluidoenelmediodecul=voquecon=eneademássuerofetalbovino.LavíadePI3K/AKTesac=vadaporLIFyescrucialparaelmantenimientodelaexpresiónyac=vidaddelosfactoresdetranscripción fundamentalesen CME,Oct4, Sox2 yNanog. En los úl=mos años fue reportado que laSUMOilacióndeAkt1 regulalaac=vidaddeestaquinasa,conconsecuenciasdirectasenelpatróndesplicing,crecimientocelularysupervivenciaendiferenteslíneascelulares.Sinembargo,elroldeestamodificaciónpost-traduccional(MPT)deAkt1aúnnohasidoestudiadaenCME.Nuestra hipótesis postula que la SUMOilación de Akt1 es relevante para el mantenimiento de laspropiedades fundamentales de CME. El obje=vo del presente trabajo es estudiar el efecto de dichaMPTdeAkt1sobrelaac=vidaddelpromotordeNanog.Paraelloco-transfectamosCMEconvectoresde expresión de variantes de Akt1 con diferente capacidad de ser SUMOiladas junto con un vectorreportero del sistema Luciferasa controlado por el promotor de Nanog. Para el análisis estadís=cou=lizamos Modelos Lineales Mixtos. Observamos que las variantes de Akt1 que pueden serSUMOiladas inducen la ac=vidad de este promotor, mientras que este efecto no se observa conaquellas variantes cuya SUMOilación se ve disminuida. Esto sugiere que la SUMOilación de Akt1 esimportante para la inducción de Nanog. Con el propósito de estudiar el mecanismo molecularinvolucrado, analizamos la posible par=cipación de GSK3-B, STAT3 y p53. Para ello realizamostratamientoscon2i,ausenciadeLIFou=lizamosunalíneacelulardeCMEp53knockout,generadaennuestro laboratorio. Nuestros resultados sugieren que ninguno de estos factores seria mediador delefecto encontrado. Actualmente nos encontramos estudiando otros posibles intermediariosinvolucrados.